Γιατί μερικές φορές εμείς μπλε και κόκκινο με το σύστημα φωτισμού ενός οπτικού μικροσκοπίου;

Πιθανότατα να σκεφτόμαστε μικροσκοπία φθορισμού , όπου χρησιμοποιούνται μπλε και κόκκινο φως σε συνδυασμό, αλλά όχι ως πηγή φωτισμού για το ίδιο το μικροσκόπιο.

Εδώ είναι η κατανομή:

1. Φωτισμός:

* Λευκό φως είναι η πρωταρχική πηγή φωτισμού στα περισσότερα οπτικά μικροσκόπια, συμπεριλαμβανομένων μικροσκοπίων φθορισμού. Φωτίζει το δείγμα που προβλήθηκε.

2. Φθορισμός:

* Σε μικροσκοπία φθορισμού , συγκεκριμένες βαφές (που ονομάζονται φθοροφόρα) χρησιμοποιούνται για την επισήμανση του δείγματος. Αυτές οι βαφές εκπέμπουν φως ενός συγκεκριμένου χρώματος όταν διεγείρονται από το φως ενός διαφορετικού χρώματος.

* Μπλε φως χρησιμοποιείται συχνά για να διεγείρει Πράσινες φθορίζουσες πρωτεΐνες (GFP) , τα οποία χρησιμοποιούνται συνήθως ως γενετικοί δείκτες.

* κόκκινο φως χρησιμοποιείται συχνά για να διεγείρει κόκκινες φθορίζουσες πρωτεΐνες (RFP) ή άλλες βαφές που εκπέμπουν κόκκινο φθορισμό.

3. Φίλτρα:

* Το μικροσκόπιο χρησιμοποιεί φίλτρα για να διαχωρίσει το φως διέγερσης από τον εκπεμπόμενο φθορισμό.

* Φίλτρο διέγερσης: Αυτό το φίλτρο επιτρέπει μόνο στο συγκεκριμένο μήκος κύματος φωτός που ενθουσιάζει το φθοροφόρο να περάσει.

* Φίλτρο εκπομπών: Αυτό το φίλτρο επιτρέπει μόνο στο συγκεκριμένο μήκος κύματος του φωτός που εκπέμπεται από το φθοροφόρο να φτάσει στον παρατηρητή.

Εδώ λειτουργεί:

1. διέγερση: Το μπλε φως κατευθύνεται πάνω στο δείγμα, συναρπαστικά τα μόρια GFP εντός του δείγματος.

2. εκπομπή: Τα διεγερμένα μόρια GFP εκπέμπουν πράσινο φως.

3. Φιλτράρισμα: Το κόκκινο φως διέγερσης εμποδίζεται από ένα φίλτρο εκπομπής, επιτρέποντας μόνο στον πράσινο φθορισμό να φτάσει στο μάτι του παρατηρητή ή στην κάμερα.

Γιατί να χρησιμοποιήσετε μπλε και κόκκινο;

* Διακεκριμένα χρώματα: Το μπλε και το κόκκινο φως επιλέγονται για τα ξεχωριστά μήκη κύματος τους, επιτρέποντάς τους να διεγείρουν και να ανιχνεύσουν διαφορετικά φθοροφόρα. Αυτό επιτρέπει την απεικόνιση πολλαπλών στόχων μέσα σε ένα μόνο δείγμα.

* Φασματικός διαχωρισμός: Το μπλε και το κόκκινο φως είναι σχετικά μακριά στο ηλεκτρομαγνητικό φάσμα, καθιστώντας ευκολότερη τη διήθηση των ανεπιθύμητων μηκών κύματος και την απομόνωση του συγκεκριμένου φθορισμού.

Συνοπτικά:

* Το μπλε και το κόκκινο φως χρησιμοποιούνται σε μικροσκοπία φθορισμού για να διεγείρουν διαφορετικά φθοροφόρα, αλλά όχι ως η κύρια πηγή φωτισμού.

* Τα φίλτρα είναι απαραίτητα για τον διαχωρισμό του φωτός διέγερσης από τον εκπεμπόμενο φθορισμό, επιτρέποντας την απεικόνιση συγκεκριμένων στόχων μέσα σε ένα δείγμα.