Πώς να διαγράψετε μια βακτηριακή καλλιέργεια

Η ραβδώσεις βακτηριακής καλλιέργειας επιτρέπει στα βακτήρια να αναπαραχθούν σε ένα μέσο καλλιέργειας σε ελεγχόμενο περιβάλλον. Η διαδικασία περιλαμβάνει την εξάπλωση βακτηρίων σε μια πλάκα άγαρ και τη δυνατότητα να επωαστούν σε μια συγκεκριμένη θερμοκρασία για ένα χρονικό διάστημα. Η βακτηριακή ράβδωση μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό και την απομόνωση καθαρών βακτηριακών αποικιών από έναν μικτό πληθυσμό. Οι μικροβιολόγοι χρησιμοποιούν μεθόδους βακτηριακής και άλλων μικροβιακών καλλιεργειών για τον εντοπισμό μικροοργανισμών και τη διάγνωση λοίμωξης.

Τι χρειάζεστε:

• Πλάκα καλλιέργειας με μικροοργανισμούς
• Εμβολιασμός θηλιάς ή αποστειρωμένες οδοντογλυφίδες
• Πλάκες άγαρ
• Καυστήρας Bunsen ή άλλο όργανο παραγωγής φλόγας
• Γάντια
• Κασέτα

Δείτε πώς:

1. Ενώ φοράτε γάντια, αποστειρώστε μια θηλιά εμβολιασμού τοποθετώντας την υπό γωνία πάνω από μια φλόγα. Η θηλιά πρέπει να γίνει πορτοκαλί πριν την αφαιρέσετε από τη φωτιά. Μια αποστειρωμένη οδοντογλυφίδα μπορεί να αντικαταστήσει τη θηλιά εμβολιασμού. όχι τοποθετήστε τις οδοντογλυφίδες πάνω σε φωτιά.
2. Αφαιρέστε το καπάκι από μια πλάκα καλλιέργειας που περιέχει τον επιθυμητό μικροοργανισμό.
3. Ψύξτε τον βρόγχο εμβολιασμού τρυπώντας τον στο άγαρ σε σημείο που δεν περιέχει αποικία βακτηρίων.
4. Διαλέξτε μια αποικία και ξύστε λίγο από τα βακτήρια χρησιμοποιώντας τον βρόχο. Φροντίστε να κλείσετε το καπάκι.
5. Χρησιμοποιώντας μια νέα πλάκα άγαρ, ανασηκώστε το καπάκι τόσο όσο για να εισαγάγετε τη θηλιά.
6. Κάντε ραβδώσεις τη θηλιά που περιέχει τα βακτήρια στο επάνω άκρο της πλάκας άγαρ, κινούμενη σε οριζόντιο μοτίβο ζιγκ-ζαγκ μέχρι να καλυφθεί το 1/3 της πλάκας.
7. Αποστειρώστε τη θηλιά ξανά στη φλόγα και ψύξτε την στην άκρη του άγαρ μακριά από τα βακτήρια στο πιάτο που μόλις ρίξατε ραβδώσεις.
8. Περιστρέψτε το πιάτο περίπου 60 μοίρες και απλώστε τα βακτήρια από το τέλος της πρώτης ράβδου σε μια δεύτερη περιοχή χρησιμοποιώντας την ίδια κίνηση στο βήμα 6.
9. Αποστειρώστε ξανά τον βρόχο χρησιμοποιώντας τη διαδικασία στο βήμα 7.
10. Περιστρέψτε το πιάτο περίπου 60 μοίρες και απλώστε τα βακτήρια από το τέλος της δεύτερης ράβδου σε μια νέα περιοχή με το ίδιο μοτίβο.
11. Αποστειρώστε ξανά τον βρόχο.
12. Τοποθετήστε το καπάκι και στερεώστε το με ταινία. Αναποδογυρίστε την πλάκα και επωάστε όλη τη νύχτα στους 37 βαθμούς Κελσίου (98,6 βαθμούς Φαρενάιτ).
13. Θα πρέπει να δείτε βακτηριακά κύτταρα να αναπτύσσονται κατά μήκος των ραβδώσεων και σε απομονωμένες περιοχές.

Συμβουλές:

1. Όταν αποστειρώνετε τη θηλιά εμβολιασμού, βεβαιωθείτε ότι ολόκληρη η θηλιά γίνεται πορτοκαλί πριν τη χρησιμοποιήσετε στις πλάκες άγαρ.
2. Όταν κάνετε ραβδώσεις στο άγαρ με τη θηλιά, φροντίστε να κρατάτε τη θηλιά οριζόντια και μόνο την επιφάνεια του άγαρ.
3. Εάν χρησιμοποιείτε αποστειρωμένες οδοντογλυφίδες, χρησιμοποιήστε μια νέα οδοντογλυφίδα όταν εκτελείτε κάθε νέα ράβδωση. Πετάξτε όλες τις χρησιμοποιημένες οδοντογλυφίδες.

Ασφάλεια:

Όταν αναπτύσσετε βακτηριακές αποικίες, θα έχετε να κάνετε με εκατομμύρια βακτήρια. Είναι σημαντικό να ακολουθείτε όλους τους κανόνες ασφαλείας του εργαστηρίου. Θα πρέπει να λαμβάνονται προφυλάξεις για να διασφαλιστεί ότι δεν εισπνέετε, καταπίνετε ή αφήνετε αυτά τα μικρόβια να αγγίξουν το δέρμα σας. Οι βακτηριακές πλάκες πρέπει να διατηρούνται κλειστές και να στερεώνονται με ταινία κατά την επώαση. Τυχόν ανεπιθύμητες βακτηριακές πλάκες θα πρέπει να απορρίπτονται σωστά τοποθετώντας τις σε αυτόκλειστο για να σκοτωθούν τα βακτήρια πριν τις απορρίψετε. Μπορεί επίσης να χυθεί οικιακή χλωρίνη πάνω στις βακτηριακές αποικίες για να καταστραφούν.