Ποια είναι η διαφορά μεταξύ In-situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας

Η κύρια διαφορά μεταξύ του in situ υβριδισμού και της ανοσοϊστοχημείας είναι ότι ο in situ υβριδισμός περιλαμβάνει την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης σε λεπτές τομές ιστού ή κύτταρα τοποθετημένα σε πλακίδια, ενώ η ανοσοϊστοχημεία περιλαμβάνει την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας ή περιοχής DNA ή RNA.

Γενικά, ο in situ υβριδισμός και η ανοσοϊστοχημεία είναι πολύτιμα εργαλεία για τον εντοπισμό της κυτταρικής έκφρασης συγκεκριμένων πρωτεϊνών ή μεταγραφών RNA εντός του ιστού.

Βασικές περιοχές που καλύπτονται

1. Τι είναι In-situ Hybridization
– Ορισμός, Χαρακτηριστικά, Σημασία
2. Τι είναι η Ανοσοϊστοχημεία
– Ορισμός, Χαρακτηριστικά, Σημασία
3. Ομοιότητες μεταξύ In-situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας
– Περίληψη κοινών χαρακτηριστικών
4. Διαφορά μεταξύ In-situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας
– Σύγκριση βασικών διαφορών

Βασικοί όροι

Ανοσοϊστοχημεία, In-situ Υβριδισμός

Τι είναι η In-situ Hybridization

Γενικά, η in-situ υβριδοποίηση (ISH) είναι μια τεχνική που ανιχνεύει τον εντοπισμό ενός συγκεκριμένου τμήματος νουκλεϊκού οξέος μέσα σε ένα τμήμα ιστού. Ως εκ τούτου, ανιχνεύει συγκεκριμένο DNA, RNA και τροποποιημένα νουκλεϊκά οξέα σε τμήματα ιστού ή τοποθετημένα κύτταρα σε μια αντικειμενοφόρο. Επιπλέον, ο in situ υβριδισμός χρησιμοποιεί ανιχνευτές για την ανίχνευση της συμπληρωματικής αλληλουχίας νουκλεϊκού οξέος που υπάρχει στο δείγμα. Οι ανιχνευτές δίκλωνου DNA (dsDNA), οι μονόκλωνοι ανιχνευτές DNA (ssDNA), οι ανιχνευτές RNA (ριβοανιχνευτές) και τα συνθετικά ολιγονουκλεοτίδια είναι οι κύριοι τύποι ανιχνευτών που χρησιμοποιούνται στον in situ υβριδισμό.

Εικόνα 1:RNA in situ υβριδισμός – Τμήμα ιστού FFPE ανθρώπινου μελανώματος

Επιπλέον, αυτοί οι ανιχνευτές επισημαίνονται με ραδιενεργές ετικέτες όπως 32P, 35S και 3H ή μη ραδιενεργές ετικέτες όπως βιοτίνη, διγοξιγενίνη και φθορίζουσες βαφές. Συνήθως, ο in situ υβριδισμός μπορεί να ανιχνεύσει τη μορφολογία και τη δομή του πληθυσμού των μικροοργανισμών στη μικροβιολογία. Στην παθολογία, είναι σημαντικό για το προφίλ του παθογόνου και την ανώμαλη γονιδιακή έκφραση. Επιπλέον, το προφίλ γονιδιακής έκφρασης σε εμβρυϊκούς ιστούς είναι η εφαρμογή του in situ υβριδισμού στην αναπτυξιακή βιολογία. Στον καρυότυπο και τη φυλογενετική ανάλυση, τα πρότυπα μεμονωμένων χρωμοσωμάτων και οι χρωμοσωμικές εκτροπές μπορούν να ανιχνευθούν με επιτόπου υβριδισμό. Επιπλέον, είναι σημαντικό στη χρωμοσωμική χαρτογράφηση.

Τι είναι η ανοσοϊστοχημεία

Η ανοσοϊστοχημεία (IHC) είναι μια σημαντική εφαρμογή αντισωμάτων για τον προσδιορισμό της κατανομής ενός συγκεκριμένου αντιγόνου στην υγεία και τις ασθένειες. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό για την ανίχνευση ειδικών αντιγόνων όγκου και καρκίνου. Το πιο σημαντικό είναι ότι η ανοσοϊστοχημεία είναι σημαντική για την ανίχνευση καλοήθων και κακοήθων όγκων χρησιμοποιώντας ειδικούς δείκτες όγκου. Κανονικά, η τεχνική μπορεί να αναγνωρίσει τους τύπους κυττάρων και την προέλευση της μετάστασης.

Εικόνα 2:Ανοσοχρώση

Επιπλέον, η ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιεί μονοκλωνικά ή πολυκλωνικά αντισώματα για να ανιχνεύσει τα συγκεκριμένα αντιγόνα στους ιστούς. Τα πρωτογενή και δευτερογενή αντισώματα είναι οι δύο τύποι αντισωμάτων στην ανοσοϊστοχημεία. Γενικά, τα πρωτογενή αντισώματα συνδέονται με το ειδικό αντιγόνο στο δείγμα ιστού. Ωστόσο, τα δευτερεύοντα αντισώματα συνδέονται με τα πρωτεύοντα αντισώματα. Τα συνδετικά μόρια στα δευτερεύοντα αντισώματα, όπως η βιοτίνη, βοηθούν στην ανίχνευση της δέσμευσης των δευτερογενών αντισωμάτων.

Ομοιότητες μεταξύ In-situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας

• Ο in-situ υβριδισμός και η ανοσοϊστοχημεία είναι δύο σημαντικά εργαλεία για την ανίχνευση της κυτταρικής έκφρασης.
• Και οι δύο τεχνικές μπορούν να ανιχνεύσουν εντοπισμένη κυτταρική έκφραση σε λεπτούς ιστούς ή σε κύτταρα τοποθετημένα σε διαφάνειες.

Διαφορά μεταξύ In-situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας

Ορισμός

Η in-situ υβριδοποίηση αναφέρεται σε μια τεχνική που χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας νουκλεϊκών οξέων σε ένα βιολογικό δείγμα, ενώ η ανοσοϊστοχημεία αναφέρεται σε μια τεχνική που χρησιμοποιεί αντισώματα για τον έλεγχο ορισμένων αντιγόνων σε ένα δείγμα .

Ανίχνευση

Η in-situ υβριδοποίηση ανιχνεύει εντοπισμένο DNA και RNA ενώ η ανοσοϊστοχημεία ανιχνεύει εντοπισμένες πρωτεΐνες.

Σημασία

Συνήθως, ο in-situ υβριδισμός είναι μια τεχνική που επιτρέπει τον ακριβή εντοπισμό ενός συγκεκριμένου τμήματος νουκλεϊκού οξέος μέσα σε ένα ιστολογικό τμήμα, ενώ η ανοσοϊστοχημεία είναι μια ισχυρή τεχνική που εκμεταλλεύεται τη συγκεκριμένη δέσμευση μεταξύ αντισώματος και αντιγόνου για την ανίχνευση και τον εντοπισμό συγκεκριμένων αντιγόνων σε κύτταρα και ιστούς.

Μέθοδος ανίχνευσης

Η in-situ υβριδοποίηση χρησιμοποιεί ανιχνευτές νουκλεϊκών οξέων για την ανίχνευση συμπληρωματικών νουκλεϊκών οξέων στο δείγμα, ενώ η ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιεί αντισώματα για την ανίχνευση και την απεικόνιση συγκεκριμένων πρωτεϊνών στο δείγμα.

Σημασία

Ο επιτόπιος υβριδισμός επιτρέπει την ανίχνευση και τον ακριβή εντοπισμό μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας νουκλεϊκού οξέος μέσα σε ένα μεμονωμένο κύτταρο, ενώ η ανοσοϊστοχημεία καθορίζει την κατανομή στους ιστούς ενός αντιγόνου που ενδιαφέρει την υγεία και την ασθένεια.

Συμπέρασμα

Συνοπτικά, ο in-situ υβριδισμός και η ανοσοϊστοχημεία είναι δύο τεχνικές που ανιχνεύουν εντοπισμένη κυτταρική έκφραση σε δείγματα όπως λεπτές τομές ιστού ή κύτταρα τοποθετημένα σε διαφάνειες. Γενικά, ο in situ υβριδισμός ανιχνεύει την παρουσία ενός συγκεκριμένου κομματιού νουκλεϊκών οξέων ενώ η ανοσοϊστοχημεία ανιχνεύει την παρουσία μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης στο δείγμα. Επομένως, ο in situ υβριδισμός χρησιμοποιεί ανιχνευτές νουκλεϊκού οξέος για υβριδισμό με το νουκλεϊκό οξύ που μας ενδιαφέρει ενώ η ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιεί αντισώματα για την ανίχνευση των πρωτεϊνών που παρουσιάζουν. Ως εκ τούτου, η κύρια διαφορά μεταξύ του in-situ υβριδισμού και της ανοσοϊστοχημείας είναι ο τύπος ανίχνευσης.