Τι είναι για το δείπνο; Ταχέως προσδιορίζοντας τα μη περιγραφόμενα είδη σε ένα εμπορικό πακέτο μυκήτων
1. Εξέταση και προετοιμασία:
- Ανοίξτε προσεκτικά το πακέτο εμπορικών μυκήτων, διατηρώντας τυχόν πληροφορίες συσκευασίας που μπορεί να παρέχουν ενδείξεις σχετικά με την προέλευση ή την πηγή των μυκήτων.
- Αφαιρέστε απαλά τους μύκητες από τη συσκευασία, φροντίζοντας να μην βλάψετε τις λεπτές δομές.
- Προετοιμάστε τους μύκητες για λεπτομερή εξέταση με απαλά καθαρισμό οποιουδήποτε εδάφους ή συντριμμιών με μια μαλακή βούρτσα.
2. Μορφολογική εξέταση:
- Χρησιμοποιήστε έναν μεγεθυντικό φακό ή μικροσκόπιο για να παρατηρήσετε στενά τα μορφολογικά χαρακτηριστικά των μυκήτων, όπως:
- Σχήμα και μέγεθος του καρποφόρου σώματος
- Παρουσία και χρώμα ενός καπακιού, στελέχους και βράγχους
- υφή των επιφανειών του καπακιού και των στελεχών
- Χρώμα της εκτύπωσης σπορίων
3. Μικροσκοπική ανάλυση:
- Προετοιμάστε μικροσκοπικές διαφάνειες σημαντικών δομών όπως η μορφολογία των σπορίων, η βασιτιδαία, η κυστιδία, οι υφές και οποιεσδήποτε άλλες διακριτικές δομές.
- Χρησιμοποιήστε εξειδικευμένους λεκέδες, όπως γαλακτοφαινόλη βαμβάκι μπλε ή αντιδραστήριο Melzer, για να ενισχύσετε συγκεκριμένα κυτταρικά συστατικά και να διευκολύνετε την παρατήρηση.
4. Εκχύλιση DNA:
- Ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή, εκχύλετε το γονιδιωματικό DNA από ένα μικρό δείγμα των μυκήτων χρησιμοποιώντας ένα εμπορικά διαθέσιμο κιτ εκχύλισης DNA.
5. Ενίσχυση PCR:
- Σχεδιασμός εκκινητών για συγκεκριμένες περιοχές του DNA, όπως η εσωτερική μεταγραφόμενη περιοχή διαχωριστή (ITS), οι οποίες χρησιμοποιούνται συνήθως για μυκητιακή ταυτοποίηση.
- Εκτελέστε την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) χρησιμοποιώντας το εκχυλισμένο DNA και τους σχεδιασμένους εκκινητές.
6. ΑΝΤΙΜΕΤΩΠΙΣΗ DNA:
- Καθαρίστε τα προϊόντα PCR και στείλτε τα για αλληλουχία Sanger, η οποία παρέχει την αλληλουχία DNA της περιοχής -στόχου.
7. Ανάλυση αναζήτησης και δεδομένων έκρηξης:
- Συγκρίνετε την ληφθείσα ακολουθία DNA με γνωστές μυκητιακές ακολουθίες χρησιμοποιώντας τη βάση δεδομένων βασικής τοπικής ευθυγράμμισης εργαλείων αναζήτησης (Blast).
- Αναλύστε τις ομοιότητες αλληλουχίας και οποιεσδήποτε διαθέσιμες ταξινομικές πληροφορίες για να προσδιορίσετε εάν οι μύκητες ταιριάζουν γνωστά είδη ή αν αντιπροσωπεύει ένα μη περιγραφόμενο είδος.
8. Φυλογενετική ανάλυση:
- Εάν οι μύκητες παρουσιάσουν σημαντική απόκλιση από γνωστά είδη, πραγματοποιήστε μια φυλογενετική ανάλυση για να συμπεράνετε την εξελικτική σχέση του με άλλα περιγραφόμενα είδη.
9. Ταξινομική περιγραφή:
- Με βάση τις μορφολογικές, μικροσκοπικές και μοριακές αναλύσεις, καταρτίζουν μια λεπτομερή ταξινομική περιγραφή των μυκήτων. Αυτό περιλαμβάνει:
- Όνομα γένους και ειδών (αν δεν περιγραφεί)
- Λεπτομερής περιγραφή των μορφολογικών χαρακτηριστικών
- Χαρακτηριστικά αλληλουχίας DNA
- Γεωγραφική τοποθεσία και πληροφορίες οικοτόπων
- Πιθανή οικολογική σημασία
10. Δημοσίευση:
- Υποβάλετε την ταξινομική περιγραφή σε ένα σχετικό επιστημονικό περιοδικό ή βάση δεδομένων, μαζί με υποστηρικτικές εικόνες και δεδομένα, για επίσημη δημοσίευση και αναγνώριση των νέων ειδών.
Συνδυάζοντας τη μορφολογική εξέταση, τη μικροσκοπική ανάλυση, τις μοριακές τεχνικές και την ταξινομική εμπειρογνωμοσύνη, είναι δυνατόν να προσδιοριστούν ταχέως και να περιγραφούν τα μη περιγραφόμενα είδη που βρίσκονται σε ένα εμπορικό πακέτο μυκήτων. Αυτό συμβάλλει στην κατανόηση της μυκητιακής πολυμορφίας και παρέχει πολύτιμες πληροφορίες για τις οικολογικές μελέτες, τις προσπάθειες διατήρησης και την πρόοδο των μυκολογικών γνώσεων.
