Πώς προσδιορίζεται ο κλώνος προτύπου για ένα συγκεκριμένο γονίδιο;
1. Αρχή μεταγραφής: Η διαδικασία της μεταγραφής αρχίζει με τη δέσμευση της RNA πολυμεράσης σε μια συγκεκριμένη αλληλουχία DNA που ονομάζεται Προαγωγός .
2. κατευθυντικότητα: Οι υποψήφιοι έχουν καθορισμένο προσανατολισμό. Υπαγορεύουν την κατεύθυνση στην οποία η πολυμεράση RNA θα κινηθεί κατά μήκος του DNA για να μεταγράψει το γονίδιο.
3. Επιλογή κλώνου προτύπου: Η RNA πολυμεράση χρησιμοποιεί ένα κλώνο DNA ως πρότυπο για να συνθέσετε ένα συμπληρωματικό μόριο RNA. Αυτό το κλώνο προτύπου είναι το μη κωδικοποιημένο σκέλος , επίσης γνωστή ως αντινοηματική σκέλη .
4. Ο άλλος κλώνος DNA, ο οποίος δεν χρησιμοποιείται ως πρότυπο, ονομάζεται κωδικοποιητικός κλώνος ή το Sense strand . Η αλληλουχία του είναι ίδια με το μεταγραφόμενο RNA, εκτός από την υποκατάσταση της ουρακίλη (U) για θυμίνη (Τ) στο RNA.
Συνοπτικά:
* Strand Template: Μη κωδικοποιητική, αντιπληροφοριακή κλώνη, που χρησιμοποιείται από πολυμεράση RNA για μεταγραφή.
* μη-μνημόνιο κλώνο: Η κωδικοποίηση, Sense Strand, ταιριάζει με την ακολουθία του μεταγραφόμενου RNA (με U αντί του T).
Σημαντικές σημειώσεις:
* Ο κλώνος του προτύπου δεν είναι πάντα το ίδιο για διαφορετικά γονίδια. Ο προσανατολισμός του εξαρτάται από τη θέση και τον προσανατολισμό του προαγωγού.
* Ο κλώνος προτύπου καθορίζεται πειραματικά , με τον προσδιορισμό του κλώνου που χρησιμοποιείται από RNA πολυμεράση κατά τη διάρκεια της μεταγραφής. Τεχνικές όπως το s1 nuclease χαρτογράφηση Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να επιβεβαιώσει το κλώνο προτύπου.
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν θέλετε περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με οποιοδήποτε από αυτά τα βήματα!
