Πώς εμβολιάζετε μια μυκητιακή κουλτούρα στο ζωμό;
Υλικά:
* Μυκητιακή κουλτούρα: Μια καθαρή κουλτούρα του επιθυμητού μύκητα σας, κατά προτίμηση σε κλίση ή πλάκες άγαρ.
* Μέσα ζωμού: Ένα αποστειρωμένο υγρό μέσο κατάλληλο για μυκητιακή ανάπτυξη (π.χ., ζωμός δεξτρόζης Sabouraud, ζωμός δεξτρόζης πατάτας).
* Αποστολείς φιάλες Erlenmeyer ή σωλήνες καλλιέργειας: Κατάλληλο μέγεθος για τον όγκο του ζωμού που χρησιμοποιείτε.
* Bunsen Burner ή Stuile Hood: Για τη διατήρηση ενός αποστειρωμένου περιβάλλοντος.
* αποστειρωμένο βρόχο εμβολιασμού ή βελόνα: Για τη μεταφορά της μυκητιακής κουλτούρας.
* απολυμαντικό: 70% αιθανόλη ή άλλο κατάλληλο απολυμαντικό για επιφάνειες καθαρισμού.
* Γάντια: Φορέστε καθαρά γάντια κατά τη διάρκεια ολόκληρης της διαδικασίας.
Διαδικασία:
1. Προετοιμάστε το ζωμό:
* Προετοιμάστε τα μέσα ζωμού σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.
* Αποσυνδέστε το ζωμό με αυτόκλειστο στους 121 ° C για 15-20 λεπτά.
* Αφήστε το ζωμό να κρυώσει σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τον ενοφθαλμισμό.
2. Αποστείνετε την περιοχή εργασίας σας:
* Καθαρίστε διεξοδικά τον χώρο εργασίας σας με απολυμαντικό.
* Εάν χρησιμοποιείτε έναν καυστήρα Bunsen, φωτίζετε και δημιουργήστε μια αποστειρωμένη ζώνη γύρω από τη φλόγα. Εάν χρησιμοποιείτε μια αποστειρωμένη κουκούλα, ενεργοποιήστε το και αφήστε το να τρέξει για τουλάχιστον 15 λεπτά.
3. Προετοιμάστε το εργαλείο εμβολιασμού:
* Αποσυνδέψτε τον βρόχο εμβολιασμού ή τη βελόνα χρησιμοποιώντας μια φλόγα καυστήρα Bunsen (θερμότητα σε κόκκινο καυτή) ή σε αποστειρωμένη κουκούλα (ακολουθήστε τις οδηγίες της κουκούλας).
* Αφήστε το εργαλείο να κρυώσει ελαφρώς πριν μεταφέρετε τη μυκητιακή κουλτούρα.
4. Μεταφέρετε τη μυκητιακή κουλτούρα:
* Ανοίξτε το δοχείο μυκήτων καλλιέργειας (κλίση ή πλάκα άγαρ) κάτω από την αποστειρωμένη ζώνη.
* Εν συντομία φλόγα το άνοιγμα του δοχείου εάν χρησιμοποιείτε έναν καυστήρα Bunsen.
* Χρησιμοποιώντας το αποστειρωμένο εργαλείο εμβολιασμού, αφαιρέστε προσεκτικά μια μικρή ποσότητα μυκητιακής ανάπτυξης από την άκρη της αποικίας.
* Μεταφέρετε το εμβόλιο στα αποστειρωμένα μέσα ζωμού στη φιάλη ή τον σωλήνα σας.
* Βεβαιωθείτε ότι ο εμβολιασμός είναι βυθισμένος στο ζωμό.
5. επώαση:
* Κλείστε τη φιάλη ή το σωλήνα σφιχτά για να αποφύγετε τη μόλυνση.
* Επωφελήστε τον πολιτισμό στη βέλτιστη θερμοκρασία για τα μυκητιακά σας είδη.
* Παρακολουθήστε τακτικά την ανάπτυξη του μύκητα.
Προφυλάξεις ασφαλείας:
* Αποστειρωμένες τεχνικές: Διατηρήστε τη στειρότητα καθ 'όλη τη διάρκεια της διαδικασίας για την πρόληψη της μόλυνσης.
* Ασφάλεια εργαστηρίου: Φορέστε ένα εργαστηριακό παλτό, γάντια και προστασία των ματιών όταν χειρίζεστε μυκητιακούς πολιτισμούς.
* Μυκητιακά σπόρια: Να είστε ενήμεροι για το δυναμικό για τα μυκητιακά σπόρια να γίνουν αερομεταφερόμενα, καθώς ορισμένοι μύκητες μπορούν να προκαλέσουν αναπνευστικά προβλήματα. Εργαστείτε σε μια καλά αεριζόμενη περιοχή.
Σημαντικές σημειώσεις:
* μυκητιακά είδη: Η συγκεκριμένη διαδικασία μπορεί να ποικίλει ελαφρώς ανάλογα με τον τύπο του μύκητα με τον οποίο εργάζεστε. Ανατρέξτε στην κατάλληλη βιβλιογραφία ή συμβουλευτείτε έναν μυκολόγο για καθοδήγηση.
* Προϋποθέσεις ανάπτυξης: Βελτιστοποιήστε τις συνθήκες επώασης (θερμοκρασία, pH κ.λπ.) με βάση τις απαιτήσεις των ειδικών σας μυκήτων.
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν έχετε άλλες ερωτήσεις!