Πώς μπορεί να χρησιμοποιηθεί η χρωματογραφία για να δείξει ότι η υδρόλυση του αμύλου παράγει μόνο μία ζάχαρη;
1. Προετοιμασία δείγματος:
- Αποκτήστε το υδρολυμένο δείγμα αμύλου.
- Προετοιμάστε δύο σύνολα δειγμάτων:
- Δείγμα Α:Υδρολυμένο διάλυμα αμύλου
- Δείγμα Β:Μια γνωστή τυποποιημένη λύση που περιέχει ένα μείγμα διαφορετικών σακχάρων (όπως γλυκόζη, φρουκτόζη, σακχαρόζη κ.λπ.)
2. Επιλέξτε μια κατάλληλη τεχνική χρωματογραφίας:
- Επιλέξτε μια κατάλληλη τεχνική χρωματογραφίας, όπως χρωματογραφία λεπτού στρώματος (TLC) ή χρωματογραφία χαρτιού.
3. Προετοιμασία της χρωματογραφικής πλάκας ή χαρτιού:
- Για TLC, προετοιμάστε μια πλάκα TLC χρησιμοποιώντας μια κατάλληλη στατική φάση (π.χ. πηκτή πυριτικής).
- Για χρωματογραφία χαρτιού, χρησιμοποιήστε χρωματογραφικό χαρτί.
4. Εφαρμογή δειγμάτων:
- εντοπίστε μια μικρή ποσότητα δείγματος Α (υδρολυμένο άμυλο) και δείγμα Β (τυποποιημένο μίγμα ζάχαρης) στη χρωματογραφική πλάκα ή χαρτί.
5. Ανάπτυξη χρωματογράφημα:
- Τοποθετήστε τη χρωματογραφική πλάκα ή το χαρτί στο θάλαμο χρωματογραφίας που περιέχει μια κατάλληλη κινητή φάση (π.χ. μίγμα διαλύτη).
- Αφήστε την κινητή φάση να μεταναστεύσει μέσω της στατικής φάσης, μεταφέροντας τα στοιχεία του δείγματος.
6. Οπτικοποίηση:
- Αφού η κινητή φάση έφτασε στο επιθυμητό επίπεδο, αφαιρέστε τη χρωματογραφική πλάκα ή το χαρτί από το θάλαμο.
- Για να απεικονίσετε τα διαχωρισμένα εξαρτήματα, χρησιμοποιήστε τις κατάλληλες μεθόδους ανίχνευσης. Για παράδειγμα, στη χρωματογραφία ζάχαρης, ψεκάζοντας την πλάκα με έναν παράγοντα απεικόνισης (π.χ. ανιλίνες, orcinol κ.λπ.) ακολουθούμενη από θέρμανση μπορεί να αποκαλύψει την παρουσία και τη θέση των σακχάρων ως χρωματιστά σημεία.
7. Σύγκριση και ανάλυση:
- Συγκρίνετε τις θέσεις και τα χρώματα των σημείων που σχηματίζονται από το υδρολυμένο δείγμα αμύλου (δείγμα Α) με εκείνα που σχηματίζονται από τα γνωστά πρότυπα ζάχαρης (δείγμα Β).
8. Ερμηνεία:
- Εάν το υδρολυμένο δείγμα αμύλου (δείγμα Α) παράγει μόνο ένα σημείο και η θέση και το χρώμα του ταιριάζουν με ένα από τα σημεία του τυπικού μείγματος ζάχαρης, υποδηλώνει ότι η υδρόλυση του αμύλου έχει αποφέρει μία μόνο ζάχαρη.
- Εάν παρατηρούνται πολλαπλά σημεία στο δείγμα Α, το καθένα που αντιστοιχεί σε διαφορετικό πρότυπο ζάχαρης, υποδεικνύει ότι η υδρόλυση του αμύλου έχει παράγει πολλαπλά σάκχαρα.
Με την εκτέλεση της χρωματογραφίας και την ανάλυση των κηλίδων που λαμβάνονται, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί εάν η υδρόλυση του αμύλου έχει οδηγήσει στο σχηματισμό μίας μόνο ζάχαρης ή πολλαπλών σακχάρων.
