Τι είναι η κάθετη μονάδα ηλεκτροφόρησης πηκτής;

Μονάδα ηλεκτροφόρησης κατακόρυφου πηκτώματος:Μηχανή διαχωρισμού

Μία μονάδα ηλεκτροφόρησης κατακόρυφου πηκτώματος είναι μια συσκευή που χρησιμοποιείται στη μοριακή βιολογία και τη βιοχημεία για να διαχωρίσει τα μόρια, κυρίως πρωτεΐνες και νουκλεϊνικά οξέα (DNA και RNA) , με βάση το μέγεθος και τη φόρτιση .

Ακολουθεί μια ανάλυση των βασικών χαρακτηριστικών του:

1. Εξαρτήματα:

* δίσκο χύτευσης πηκτής: Αυτό συγκρατεί το πήκτωμα, το οποίο είναι μια πορώδης μήτρα που ενεργεί ως μέσο διαχωρισμού.

* γυάλινες πλάκες: Δύο κάθετες γυάλινες πλάκες σάντουιτς το πήκτωμα, δημιουργώντας ένα στενό κανάλι για τη μετανάστευση δείγματος.

* Επιμελητήρια buffer: Αυτά περιέχουν το ρυθμιστικό ηλεκτροφόρησης, το οποίο διεξάγει ηλεκτρική ενέργεια και διατηρεί το pH του συστήματος.

* ηλεκτρόδια: Ένα ζεύγος ηλεκτροδίων (άνοδος και κάθοδος) παράγουν ένα ηλεκτρικό πεδίο που οδηγεί τα μόρια μέσω του πηκτώματος.

* τροφοδοτικό: Παρέχει ένα άμεσο ρεύμα στα ηλεκτρόδια, δημιουργώντας το ηλεκτρικό πεδίο για διαχωρισμό.

* Comb: Αυτό χρησιμοποιείται για τη δημιουργία πηγαδιών στο πήκτωμα, όπου φορτώνονται δείγματα.

2. Αρχή λειτουργίας:

* Το πήκτωμα είναι τυπικά κατασκευασμένο από πολυακρυλαμίδιο (Σελίδα) ή agarose , με ποικίλες πυκνότητες για τον έλεγχο του μεγέθους των πόρων.

* Τα δείγματα φορτώνονται σε πηγάδια στην κορυφή του πηκτώματος.

* Όταν εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό πεδίο, τα μόρια μεταναστεύουν μέσω του πηκτώματος προς το ηλεκτρόδιο με το αντίθετο φορτίο (θετικό για αρνητικά φορτισμένα μόρια και αντίστροφα).

* Μικρότερα μόρια μεταναστεύουν ταχύτερα Μέσα από τους πόρους της γέλης, ενώ τα μεγαλύτερα μόρια συναντούν περισσότερη αντίσταση και κινούνται πιο αργά.

* Αυτό έχει ως αποτέλεσμα ζώνες διαχωρισμού Με βάση το μέγεθος, με τα μικρότερα μόρια στο κάτω μέρος και το μεγαλύτερο στην κορυφή.

3. Εφαρμογές:

* Ανάλυση πρωτεΐνης: Προσδιορισμός του μεγέθους, της καθαρότητας και της παρουσίας.

* Ανάλυση DNA: Ανάλυση αλληλουχίας, ανάλυση πολυμορφισμού μήκους θραύσματος περιορισμού (RFLP) και κλωνοποίηση.

* Ανάλυση RNA: Αξιολόγηση της γονιδιακής έκφρασης και μελετώντας τη δομή του RNA.

4. Πλεονεκτήματα:

* Υψηλή ανάλυση: Παρέχει σαφή διαχωρισμό των μορίων με μικρές διαφορές μεγέθους.

* ευελιξία: Κατάλληλο για διάφορους τύπους δειγμάτων και εφαρμογών.

* Ποσοτική ανάλυση: Η ένταση της ζώνης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μέτρηση της ποσότητας κάθε μορίου.

5. Περιορισμοί:

* Σύνθετη ρύθμιση: Απαιτεί προσεκτική προετοιμασία και προσοχή στη λεπτομέρεια.

* χρονοβόρα: Η διαδικασία ηλεκτροφόρησης μπορεί να διαρκέσει αρκετές ώρες.

* Περιορισμένη χωρητικότητα: Το μέγεθος του πηκτώματος περιορίζει τον αριθμό των δειγμάτων που μπορούν να εκτελεστούν ταυτόχρονα.

Συνολικά, η μονάδα ηλεκτροφόρησης κατακόρυφου πηκτώματος είναι ένα βασικό εργαλείο για τους ερευνητές σε διάφορους τομείς, παρέχοντας πολύτιμες γνώσεις για τη σύνθεση και τα χαρακτηριστικά των βιολογικών μορίων.