Γιατί η αντίστροφη μεταγραφάση χρησιμοποιείται για την παραγωγή πρωτεϊνών τεχνητά;
* Ο ρόλος της αντίστροφης μεταγραφάσης: Η αντίστροφη μεταγραφάση είναι ένα ένζυμο που μεταγράφει το RNA σε DNA. Χρησιμοποιείται κυρίως στη μοριακή βιολογία για τη δημιουργία συμπληρωματικού DNA (cDNA) από το RNA Messenger (mRNA).
* Παραγωγή πρωτεΐνης: Οι πρωτεΐνες συντίθενται από το DNA μέσω μιας διαδικασίας που ονομάζεται μετάφραση. Αυτή η διαδικασία απαιτεί ριβοσώματα και RNA μεταφοράς (tRNA) για να μεταφράσει τον γενετικό κώδικα στην αλληλουχία αμινοξέων μιας πρωτεΐνης.
Λοιπόν, πώς παράγονται τεχνητά οι πρωτεΐνες;
1. κλωνοποίηση γονιδίων: Το γονίδιο που κωδικοποιεί την επιθυμητή πρωτεΐνη απομονώνεται και εισάγεται σε ένα διάνυσμα, όπως ένα πλασμίδιο.
2. Μετασχηματισμός: Ο φορέας εισάγεται σε έναν οργανισμό υποδοχής, συνήθως βακτηρίδια, τα οποία στη συνέχεια θα εκφράσουν το ξένο γονίδιο.
3. Έκφραση πρωτεΐνης: Τα μηχανήματα του κυττάρου του ξενιστή μεταφράζουν το γονίδιο σε πρωτεΐνη και η πρωτεΐνη μπορεί να καθαριστεί και να συλλεχθεί.
Πού ταιριάζει η αντίστροφη μεταγραφάση;
Η αντίστροφη μεταγραφάση είναι μερικές φορές χρησιμοποιείται ως βήμα στην παραγωγή τεχνητών πρωτεϊνών, ειδικά όταν ξεκινάτε με mRNA. Εδώ είναι:
1. Απομόνωση mRNA: Το mRNA που κωδικοποιεί την επιθυμητή πρωτεΐνη απομονώνεται από κύτταρα.
2. Σύνθεση cDNA: Η αντίστροφη μεταγραφάση χρησιμοποιείται για τη δημιουργία ενός αντιγράφου cDNA του mRNA.
3. κλωνοποίηση γονιδίων: Το cDNA στη συνέχεια κλωνοποιείται σε ένα διάνυσμα και η διαδικασία συνεχίζεται όπως περιγράφεται παραπάνω.
Συνοπτικά:
* Η αντίστροφη μεταγραφάση είναι όχι Χρησιμοποιείται άμεσα για την παραγωγή πρωτεϊνών.
* Είναι μερικές φορές Χρησιμοποιείται για τη δημιουργία cDNA από mRNA, το οποίο στη συνέχεια χρησιμοποιείται για την κλωνοποίηση γονιδίων και την έκφραση πρωτεΐνης.
