Όταν χρησιμοποιείται ένας βιολογικός φορέας, ποια διαδικασία πρέπει να πραγματοποιηθεί πριν το ανασυνδυασμένο DNA μπορεί να τοποθετηθεί στο κύτταρο ξενιστή;

Πριν το ανασυνδυασμένο ϋΝΑ μπορεί να τοποθετηθεί σε ένα κελί ξενιστή χρησιμοποιώντας ένα βιολογικό φορέα, πρέπει να πραγματοποιηθεί η ακόλουθη διαδικασία:

σύνδεση

Η σύνδεση είναι η διαδικασία συμμετοχής στο ανασυνδυασμένο DNA (που περιέχει το γονίδιο ενδιαφέροντος) με το DNA του φορέα. Αυτό γίνεται χρησιμοποιώντας ένα ένζυμο που ονομάζεται Ligase DNA , η οποία σχηματίζει δεσμούς φωσφοδιεστέρα μεταξύ των άκρων των θραυσμάτων DNA.

Εδώ είναι γιατί η σύνδεση είναι κρίσιμη:

* Συμμετοχή στο γονίδιο και το διάνυσμα: Η σύνδεση εξασφαλίζει ότι το γονίδιο ενδιαφέροντος εισάγεται στην αλληλουχία DNA του φορέα. Αυτό δημιουργεί ένα σταθερό μόριο που μπορεί να εισαχθεί στο κύτταρο ξενιστή.

* Δημιουργία λειτουργικής κατασκευής: Ο φορέας περιέχει συχνά αλληλουχίες που είναι απαραίτητες για την αντιγραφή και την έκφραση του εισαγόμενου γονιδίου εντός του κυττάρου ξενιστή. Η σύνδεση συνδέει αυτές τις αλληλουχίες με το γονίδιο ενδιαφέροντος, εξασφαλίζοντας ότι το γονίδιο μπορεί να αντιγραφεί και να μεταγραφεί μέσα στον ξενιστή.

Συνοπτικά: Η σύνδεση είναι η βασική διαδικασία που συνδέει το ανασυνδυασμένο DNA με τον φορέα, δημιουργώντας μια λειτουργική μονάδα που μπορεί να εισαχθεί σε ένα κύτταρο ξενιστή για έκφραση γονιδίων.