Πώς αποθηκεύεται το καθαρισμένο γονιδιωματικό DNA;
Συνθήκες αποθήκευσης:
* Θερμοκρασία: Το γονιδιωματικό DNA είναι πιο σταθερό όταν αποθηκεύεται στους -20 ° C ή -80 ° C .
* -20 ° C είναι κατάλληλο για βραχυπρόθεσμη αποθήκευση (εβδομάδες έως μήνες).
* -80 ° C συνιστάται για μακροπρόθεσμη αποθήκευση (μήνες έως έτη).
* Λύση: Το DNA αποθηκεύεται συνήθως σε μια λύση που παρέχει σταθερότητα και προστασία. Οι κοινές λύσεις περιλαμβάνουν:
* buffer (Tris-Edta): Ένα τυποποιημένο ρυθμιστικό διάλυμα που διατηρεί το ρΗ του διαλύματος και προστατεύει το DNA από την αποικοδόμηση από νουκλεάσες.
* tris-hcl: Παρόμοια με το TE, αλλά χωρίς EDTA. Η EDTA χηλίζει μεταλλικά ιόντα που μπορούν να υποβαθμίσουν το DNA.
* νερό: Ενώ είναι τεχνικά δυνατό, το νερό μόνο δεν είναι τόσο προστατευτικό όσο τα ρυθμισμένα διαλύματα.
δοχεία αποθήκευσης:
* Σωλήνες μικροεπεξεργαστών: Αυτοί είναι μικροί, κωνικοί σωλήνες που χρησιμοποιούνται συνήθως για την αποθήκευση δειγμάτων DNA. Είναι συνήθως κατασκευασμένα από πολυπροπυλένιο, το οποίο είναι αδρανές και ανθεκτικό.
* CryoVials: Αυτοί είναι ειδικά σχεδιασμένοι σωλήνες για την αποθήκευση δειγμάτων σε πολύ χαμηλές θερμοκρασίες. Είναι συχνά κατασκευασμένα από υψηλής ποιότητας πολυπροπυλένιο ή γυαλί και έχουν ασφαλή καπάκια για να αποφευχθούν διαρροές.
Πρόσθετες εκτιμήσεις:
* Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους ψύξης-απόψυξης: Κάθε κύκλος κατάψυξης-απόψυξης μπορεί ενδεχομένως να βλάψει το DNA. Ελαχιστοποιήστε τον αριθμό των φορών που παγώνετε και ξεπαγώστε το δείγμα.
* Ετικέτα: Σαφώς επισημάνετε τους σωλήνες σας με το όνομα του δείγματος, την ημερομηνία και τη συγκέντρωση του DNA.
* Διάρκεια αποθήκευσης: Η σταθερότητα του DNA στην αποθήκευση μπορεί να ποικίλει ανάλογα με την ποιότητα των συνθηκών DNA και της αποθήκευσης. Στην ιδανική περίπτωση, θα πρέπει να επιδιώξετε να χρησιμοποιήσετε τα δείγματα σας μέσα σε ένα ή δύο χρόνια απομόνωσης.
* μόλυνση: Αποφύγετε τη μόλυνση χρησιμοποιώντας αποστειρωμένο εξοπλισμό και τεχνικές κατά τη διάρκεια της διαδικασίας αποθήκευσης.
Σημαντική σημείωση: Οι συγκεκριμένες συνθήκες αποθήκευσης ενδέχεται να διαφέρουν ανάλογα με τη συγκεκριμένη εφαρμογή ή την κατάντη ανάλυση. Αναφέρετε πάντα τις οδηγίες του κατασκευαστή ή συμβουλευτείτε έναν επαγγελματία εργαστηρίου για καθοδήγηση σχετικά με την κατάλληλη αποθήκευση DNA.
