Τι μεταφέρει ανασυνδυασμένο DNA σε βακτήρια;
1. Το διάνυσμα:
- Το ανασυνδυασμένο ϋΝΑ εισάγεται πρώτα σε ένα διάνυσμα , το οποίο είναι ουσιαστικά ένα μόριο φορέα. Οι συνήθεις φορείς που χρησιμοποιούνται για τα βακτήρια περιλαμβάνουν:
- πλασμίδια: Μικρά, κυκλικά μόρια DNA που αναπαράγουν ανεξάρτητα από το βακτηριακό χρωμόσωμα.
- βακτηριοφάγοι: Ιοί που μολύνουν τα βακτήρια.
2. Ικανότητα:
- Τα βακτηρίδια αντιμετωπίζονται για να τα κάνουν Component , που σημαίνει ότι είναι πιο πιθανό να αναλάβουν το ξένο DNA. Αυτό συχνά περιλαμβάνει την έκθεση τους σε:
- Χλωριούχο ασβέστιο: Αυτό αποδυναμώνει το βακτηριακό κυτταρικό τοίχωμα, καθιστώντας το πιο διαπερατό στο DNA.
- Θερμικό σοκ: Αυτό προκαλεί προσωρινούς πόρους στην κυτταρική μεμβράνη, επιτρέποντας να εισέλθει στο DNA.
- Ηλεκτροδιάκριση: Αυτό χρησιμοποιεί ηλεκτρικούς παλμούς για τη δημιουργία προσωρινών πόρων στην κυτταρική μεμβράνη.
3. Μετασχηματισμός:
- Τα αρμόδια βακτήρια αναμειγνύονται με τον φορέα που περιέχει το ανασυνδυασμένο DNA.
- Ορισμένα βακτηρίδια θα αναλάβουν τον φορέα μέσω των κυτταρικών μεμβρανών τους.
4. Επιλογή:
- Τα βακτήρια που έχουν πάρει τον φορέα επιλέγονται συνήθως χρησιμοποιώντας δείκτες αντίστασης αντιβιοτικών . Ο φορέας συχνά μεταφέρει ένα γονίδιο για την αντίσταση στα αντιβιοτικά, επιτρέποντας μόνο εκείνα τα βακτήρια που έχουν πάρει το φορέα να αναπτυχθεί σε ένα μέσο που περιέχει το αντιβιοτικό.
Συνοπτικά, ο φορέας (πλασμίδιο ή βακτηριοφάγος) μεταφέρει το ανασυνδυασμένο DNA σε βακτήρια. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται μετασχηματισμός και περιλαμβάνει την κατασκευή των βακτηρίων ικανών και στη συνέχεια την παροχή του φορέα.
