Ποια είναι η αρχή πίσω από τη χρήση του αντιδραστηρίου orcinol στην εξαγωγή του RNA από τη ζύμη;
Εδώ είναι γιατί:
* Το αντιδραστήριο orcinol χρησιμοποιείται για ανίχνευση υδατανθράκων. Αντιδρά ειδικά με πεντόζες, όπως ριβόζη, για να παράγει ένα πράσινο χρώμα. Αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται συνήθως στον προσδιορισμό της συγκέντρωσης RNA , αλλά όχι στην πραγματική διαδικασία εξαγωγής.
* Η εκχύλιση RNA περιλαμβάνει διαφορετικές μεθόδους. Αυτές οι μέθοδοι συνήθως βασίζονται σε:
* λύση των κυττάρων: Για να ανοίξετε τα κύτταρα και να απελευθερώσετε το RNA.
* Αφαίρεση πρωτεϊνών: Για να διαχωρίσετε το RNA από πρωτεΐνες και άλλα κυτταρικά συστατικά.
* βροχόπτωση του RNA: Να απομονώσει το RNA από το διάλυμα.
* Κοινές μέθοδοι εκχύλισης RNA για τη ζύμη περιλαμβάνουν:
* αντιδραστήριο Trizol: Ένα διάλυμα που βασίζεται σε φαινόλη-χλωροφόρμιο που λύει τα κύτταρα και διαχωρίζει το RNA από άλλα συστατικά.
* Μέθοδος θερμής φαινόλης: Χρησιμοποιεί θερμότητα για να λυθεί και στη συνέχεια φαινόλη για την εξαγωγή RNA.
* Μέθοδοι βάσει κιτ: Αυτά προσφέρουν μια πιο βολική και τυποποιημένη προσέγγιση, συχνά βασιζόμενη σε στήλες με βάση το πυριτικό για να δεσμεύσουν το RNA.
Συνοπτικά, το αντιδραστήριο orcinol χρησιμοποιείται για ποσοτικοποίηση RNA, όχι εκχύλιση. Η εκχύλιση RNA βασίζεται σε διαφορετικές μεθόδους για να λυθεί τα κύτταρα, να απομακρύνει τις μολυσματικές ουσίες και να απομονώσει το RNA