Πώς προετοιμάζετε 0,1m Tris HCl buffer του ρΗ 8;
Υλικά:
* Βάση Tris (Tris (υδροξυμεθυλ) αμινομεθάνιο)
* 1 m HCl λύση
* Απιονισμένο νερό
* PH μετρητή ή χαρτί δείκτη pH
* Αποφοίτησε κύλινδρος
* Ποτήρι
* Ανακατεύοντας ράβδο
Διαδικασία:
1. Υπολογίστε την ποσότητα της βάσης Tris:
* Το Tris έχει μοριακό βάρος 121,14 g/mol.
* Για να προετοιμάσετε 1 λίτρο 0,1 m διάλυμα Tris, χρειάζεστε:
* 0.1 mol/l * 121.14 g/mol =12.114 g βάσης Tris
* Ρυθμίστε το ποσό αναλογικά εάν χρειάζεστε διαφορετικό όγκο buffer.
2. Διαλύστε τη βάση Tris:
* Ζυγίστε την υπολογιζόμενη ποσότητα βάσης Tris και διαλύστε την σε περίπου 800 ml απιονισμένου νερού σε ποτήρι 1 λίτρων.
* Ανακατέψτε καλά για να εξασφαλίσετε πλήρη διάλυση.
3. Ρυθμίστε το pH:
* Χρησιμοποιώντας ένα μετρητή pH: Προσθέστε αργά 1 Μ διάλυμα HCl στο διάλυμα TRIS ενώ παράλληλα παρακολουθείτε το ρΗ χρησιμοποιώντας μετρητή pH. Ανακατέψτε καλά μετά από κάθε προσθήκη.
* Χρήση χαρτιού δείκτη pH: Προσθέστε μικρές ποσότητες HCl μέχρι να επιτευχθεί το επιθυμητό ρΗ 8,0, όπως υποδεικνύεται από το χαρτί pH.
4.
* Μόλις επιτευχθεί το επιθυμητό ρΗ, προσθέστε απιονισμένο νερό για να φέρετε τον τελικό τόμο σε 1 λίτρο.
5. Ελέγξτε και ρυθμίστε το pH:
* Ελέγξτε το ρΗ με μετρητή pH ή χαρτί δείκτη και κάντε τυχόν μικρές προσαρμογές με HCl ή αραιό διάλυμα NaOH, αν χρειαστεί.
Σημαντικές σημειώσεις:
* Ασφάλεια: Η βάση Tris είναι ελαφρώς ενοχλητική για το δέρμα και τα μάτια. Φορέστε κατάλληλα γυαλιά και γάντια ασφαλείας κατά τη διάρκεια του χειρισμού.
* Βαθμονόμηση μετρητή pH: Βεβαιωθείτε ότι ο μετρητής PH σας βαθμονομείται σωστά πριν από τη χρήση.
* Εφέ θερμοκρασίας: Το ρΗ ενός ρυθμιστικού διαλύματος Tris εξαρτάται ελαφρώς από τη θερμοκρασία. Να είστε ενήμεροι για αυτό, αν χρειαστεί να χρησιμοποιήσετε το buffer σε θερμοκρασίες σημαντικά διαφορετικές από τη θερμοκρασία βαθμονόμησης.
* Αποθήκευση: Αποθηκεύστε το παρασκευασμένο ρυθμιστικό διάλυμα σε θερμοκρασία δωματίου ή σε ψυγείο για εκτεταμένη αποθήκευση.
Πρόσθετες συμβουλές:
* Ρύθμιση ρΗ: Είναι συνήθως πιο εύκολο να ρυθμίσετε το pH προς τα κάτω προσθέτοντας HCl παρά να αυξήσετε το προσθέτοντας NaOH.
* Ακρίβεια: Ένας μετρητής pH θα σας δώσει μια πιο ακριβή ανάγνωση από το χαρτί pH.
* πολλαπλά buffer: Εάν πρέπει να προετοιμάσετε διάφορα buffer, είναι πιο αποτελεσματικό να κάνετε ένα συμπυκνωμένο απόθεμα διάλυμα Tris και να το αραιώσει όπως απαιτείται.
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν έχετε περισσότερες ερωτήσεις.
