Ποιοι τύποι χημικών ουσιών που απαιτούνται για την ανάλυση νανοπατικών σε ζωικά κύτταρα με φασματοσκοπία απορρόφησης;
1. Ιδιότητες νανοσωματιδίων:
* Υλικό:
* Μεταλλικά νανοσωματίδια: Μπορεί να μην απαιτούν πρόσθετες χημικές ουσίες, καθώς οι ιδιότητες απορρόφησης τους είναι εγγενείς. Ωστόσο, μπορεί να χρειαστείτε έναν συγκεκριμένο διαλύτη (π.χ. νερό, αιθανόλη) για διασπορά και ανάλυση.
* Κβαντικές κουκκίδες: Οι ιδιότητες φθορισμού τους χρησιμοποιούνται συχνά για ανάλυση. Ωστόσο, μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί απορρόφηση υπεριώδους ακτινοβολίας.
* Άλλα νανοσωματίδια: Το συγκεκριμένο υλικό υπαγορεύει τις πιθανές αλληλεπιδράσεις με το κύτταρο και τις χημικές ανάγκες.
* Μέγεθος και σχήμα: Αυτοί οι παράγοντες επηρεάζουν το φάσμα απορρόφησης.
* Τροποποίηση επιφάνειας: Η λειτουργικοποίηση με συγκεκριμένα μόρια (π.χ. πρωτεΐνες, πολυμερή) μπορεί να επηρεάσει την απορρόφηση και να απαιτήσει συγκεκριμένες χημικές ουσίες για διαλυτοποίηση ή εκχύλιση.
2. Κυτταρική σειρά και πειραματικές συνθήκες:
* Μέσο κυτταρικής καλλιέργειας: Τα εξαρτήματα μπορούν να παρεμβαίνουν στην απορρόφηση νανοσωματιδίων. Μπορεί να χρειαστεί να χρησιμοποιήσετε ένα μέσο που ελαχιστοποιεί την απορρόφηση στο εύρος μήκους κύματος που επιλέξατε.
* Λύση κυττάρων: Για να εξαγάγετε νανοσωματίδια από τα κύτταρα, μπορεί να χρειαστείτε ένα ρυθμιστικό διάλυμα λύσης κυττάρων, το οποίο συχνά περιέχει απορρυπαντικά όπως το Triton Χ-100 για να διαταράξει τις κυτταρικές μεμβράνες.
* Μέθοδοι εκχύλισης: Ανάλογα με τις ιδιότητες νανοσωματιδίων, ενδέχεται να χρειαστείτε συγκεκριμένα αντιδραστήρια για διαχωρισμό ή καθαρισμό (π.χ. φυγοκέντρηση, μαγνητικό διαχωρισμό).
3. Ρύθμιση φασματοσκοπίας απορρόφησης:
* εύρος μήκους κύματος: Ο τύπος της φασματοσκοπίας απορρόφησης που επιλέγετε (UV-VIS, NIR κ.λπ.) υπαγορεύει τον διαλύτη και τα απαιτούμενα χημικά πρόσθετα.
* Προετοιμασία δείγματος: Μπορεί να χρειαστείτε συγκεκριμένα buffer ή αντιδραστήρια για αραίωση, διασπορά ή τυποποίηση.
Γενικά παραδείγματα:
* φασματοσκοπία UV-vis:
* νερό: Συχνά χρησιμοποιείται ως διαλύτης για τη διασπορά και τη μέτρηση νανοσωματιδίων.
* αιθανόλη: Για μερικά υδρόφοβα νανοσωματίδια.
* buffer: Για τη διατήρηση του ρΗ και της ιοντικής ισχύος, ιδιαίτερα σημαντικής για τα βιολογικά δείγματα.
* απορρυπαντικά: Για τη διαλυτοποίηση πρωτεϊνών ή άλλων μορίων που μπορεί να παρεμβαίνουν στη μέτρηση.
* Φασματοσκοπία φθορισμού:
* Πράκτορες σβέσης: Χρησιμοποιείται για τον έλεγχο του φόντου φθορισμού από το κελί ή το μέσο.
* διαλύτες: Ανάλογα με τις ιδιότητες φθορισμού του νανοσωματιδίου και του μέσου.
Σημαντικές εκτιμήσεις:
* Ασφάλεια: Ακολουθούν πάντα τις κατάλληλες οδηγίες ασφαλείας για το χειρισμό χημικών ουσιών και νανοσωματιδίων.
* Συμβατότητα: Βεβαιωθείτε ότι οι επιλεγμένες χημικές ουσίες είναι συμβατές με το νανοσωματίδιο, την κυτταρική γραμμή και την αναλυτική τεχνική.
* Ειδικότητα: Στόχος για μεθόδους που είναι ειδικές για το νανοσωματίδιο που ενδιαφέρουν για την ελαχιστοποίηση των παρεμβολών από άλλα συστατικά.
Συμβουλευτείτε πάντα αξιόπιστες πηγές (επιστημονική βιβλιογραφία, κατευθυντήριες γραμμές πωλητή) για συγκεκριμένες οδηγίες για την ανάλυση νανοσωματιδίων σε ζωικά κύτταρα χρησιμοποιώντας φασματοσκοπία απορρόφησης.