Ποια είναι η διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA

Η κύρια διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA είναι ότι, στην ELISA, η ανάπτυξη χρώματος είναι το κριτήριο ανίχνευσης για τα θετικά δείγματα, αλλά, στο ELFA, η εκπομπή φθορισμού είναι τα κριτήρια ανίχνευσης .

Το ELISA και το ELFA είναι δύο ανοσολογικές μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση πρωτεϊνών σε βιολογικά δείγματα, ιδίως αντισωμάτων και αντιγόνων. Αν και το ELISA είναι μια ευαίσθητη μέθοδος, το ELFA είναι πιο ευαίσθητο από το ELISA.

Βασικές περιοχές που καλύπτονται

1. Τι είναι το ELISA
     – Ορισμός, Τύποι, Σημασία
2. Τι είναι το ELFA
     – Ορισμός, Μέθοδος, Σημασία
3. Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ ELISA και ELFA
     – Περίληψη κοινών χαρακτηριστικών
4. Ποια είναι η διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA
     – Σύγκριση βασικών διαφορών

Βασικοί όροι

Χρωματογόνο υπόστρωμα, ELFA, ELISA, φθορογόνο υπόστρωμα, ανοσολογικές δοκιμές, ευαισθησία

Τι είναι το ELISA

ELISA (ανοσοροφητικός προσδιορισμός συνδεδεμένος με ένζυμα ) είναι ένας τύπος ενζυμικής ανοσοδοκιμασίας στερεάς φάσης που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε βιολογικά δείγματα με τη βοήθεια της ανάπτυξης χρώματος μέσω μιας ενζυματικής αντίδρασης. Με βάση τη μεθοδολογία, υπάρχουν τρεις κύριοι τύποι ELISA. άμεση ELISA, έμμεση ELISA και ELISA σάντουιτς.

Άμεση ELISA

Η άμεση ELISA είναι η πρώτη μέθοδος ELISA που αναπτύχθηκε, η οποία είναι αρκετά απλή. Εδώ, η επιφάνεια της πλάκας μικροτιτλοδότησης (στερεά φάση) επικαλύπτεται με το δείγμα. Στη συνέχεια, τα συνδεδεμένα με ένζυμα αντισώματα συνδέονται με τη συγκεκριμένη πρωτεΐνη στην πλάκα. Με την προσθήκη του χρωμογόνου υποστρώματος, είναι δυνατός ο εντοπισμός αντισωμάτων που συνδέονται με τις πρωτεΐνες.

Έμμεση ELISA

Η έμμεση ELISA είναι μια κάπως περίπλοκη μέθοδος ELISA, η οποία χρησιμοποιεί μια διαδικασία δύο σταδίων για την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης σε ένα δείγμα. Εδώ, το πρώτο βήμα είναι η επικάλυψη της πλάκας μικροτιτλοδότησης με το δείγμα και η επώασή της με έναν συγκεκριμένο τύπο πρωτογενούς αντισώματος, το οποίο συνδέεται με την πρωτεΐνη ενδιαφέροντος. Το επόμενο βήμα είναι η επώαση αυτής της πλάκας με ένα δευτερεύον αντίσωμα συνδεδεμένο με ένζυμα, το οποίο συνδέεται με το πρωτεύον αντίσωμα. Στη συνέχεια, με την προσθήκη του χρωμογόνου υποστρώματος, μπορούμε να ανιχνεύσουμε τη συγκεκριμένη πρωτεΐνη στο πιάτο λόγω της ανάπτυξης χρώματος.

Εικόνα 1:Τύποι ELISA

Ανοσομετρική/ELISA σάντουιτς

Η ELISA σάντουιτς είναι επίσης μια διαδικασία δύο βημάτων. Εδώ, το πρώτο βήμα είναι να τοποθετήσετε τη σχετική πρωτεΐνη στο δείγμα μεταξύ του πρωτογενούς και του δευτερογενούς αντισώματος. Επομένως, στο πρώτο βήμα, η πλάκα μικροτιτλοδότησης επικαλύπτεται πρώτα με το πρωτεύον αντίσωμα, αλλά όχι με το δείγμα. Δεύτερον, η πλάκα επωάζεται με το δείγμα. Τρίτον, ένα συνδεδεμένο με ένζυμο δευτερεύον αντίσωμα προστίθεται στην πλάκα. Αυτό το δευτερεύον αντίσωμα συνδέεται με την ειδική πρωτεΐνη που είναι συνδεδεμένη με το πρωτεύον αντίσωμα. Τέλος, η ανάπτυξη χρώματος μπορεί να ανιχνεύσει σύμπλοκα αντισωμάτων που συνδέονται με πρωτεΐνη στο πιάτο.

Τι είναι το ELFA

ELFA (δοκιμασία φθορισμού συνδεδεμένου με ένζυμα ) είναι ένας άλλος τύπος ενζυμικών ανοσοδοκιμών στερεάς φάσης, που εμπλέκεται στην ανάπτυξη φθορισμού αντί για χρώμα όπως στην ELISA. Ωστόσο, η γενική πειραματική διαδικασία του ELFA είναι παρόμοια με αυτή του ELISA. Η μόνη διαφορά στο ELFA είναι η χρήση ενός χρωμογόνου υποστρώματος αντί ενός χρωμογόνου υποστρώματος. Για παράδειγμα, το χρωμογόνο υπόστρωμα που χρησιμοποιείται για το ένζυμο αλκαλική φωσφατάση στην ELISA είναι ο φωσφορικός ρ-νιτροφαινυλεστέρας (PNPP). Ωστόσο, στο ELFA, το φθορογόνο υπόστρωμα που χρησιμοποιείται για το ίδιο ένζυμο αλκαλική φωσφατάση είναι ο φωσφορικός 4-μεθυλοομπελλιφερυλεστέρας (4MUP).

Το πιο σημαντικό, το ELFA είναι πιο ευαίσθητο από το ELISA. Επομένως, μπορεί να ανιχνεύσει τα αναπτυσσόμενα αντισώματα σε μικρότερο χρονικό διάστημα σε σύγκριση με το χρόνο που απαιτείται για την ανίχνευση αντισωμάτων με ELISA.

Similarities Between ELISA and ELFA

• Το ELISA και το ELFA είναι δύο τύποι ανοσολογικών αναλύσεων που βοηθούν στον εντοπισμό και τον ποσοτικό προσδιορισμό συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε βιολογικά δείγματα.
• Ο βασικός σχεδιασμός και των δύο πειραμάτων είναι ο ίδιος.
• Επίσης, και οι δύο είναι ανοσοδοκιμασίες ενζύμων στερεάς φάσης (EIA).
• Εξάλλου, είναι μέθοδοι υψηλής απόδοσης, υψηλής ευαισθησίας, ταχύτερες και αναπαραγώγιμες.

Διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA

Ορισμός

Το ELISA (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία) αναφέρεται σε μια ευαίσθητη τεχνική για την ανίχνευση και τη μέτρηση αντιγόνων ή αντισωμάτων σε διάλυμα με τη χρήση χρωμογόνων υποστρωμάτων ενώ η ELFA (ενζυμική δοκιμασία φθορισμού ) αναφέρεται σε μια ανοσολογική μέθοδο στην οποία το ένζυμο καταλύει έναν φθορισμό και όχι μια χρωματική αντίδραση. Επομένως, αυτή είναι η κύρια διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA.

Μέθοδος ανίχνευσης

Επιπλέον, το ELISA ανιχνεύει την ανάπτυξη χρώματος στη στερεά φάση, αλλά το ELFA ανιχνεύει την ανάπτυξη φθορισμού στη στερεά φάση.

Υπόστρωμα

Το υπόστρωμα που χρησιμοποιείται στην ELISA είναι χρωμογόνο ενώ το υπόστρωμα που χρησιμοποιείται στο ELFA είναι φθορογόνο.

Ευαισθησία

Μια άλλη διαφορά μεταξύ του ELISA και του ELFA είναι ότι το ELFA είναι 100 φορές πιο ευαίσθητο από το ELISA.

Μήκος της περιόδου παραθύρου

Η περίοδος παραθύρου είναι μεγαλύτερη στην ELISA, ενώ η περίοδος παραθύρου είναι περίπου πέντε ημέρες μικρότερη από την ELISA στην ELFA. Επομένως, αυτή είναι μια άλλη διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA.

Συμπέρασμα

Το ELISA είναι ένας τύπος ανοσολογικού προσδιορισμού που ανιχνεύει πρωτεΐνες σε βιολογικό δείγμα με τη δέσμευση συγκεκριμένων αντισωμάτων. Εδώ, η μέθοδος ανίχνευσης είναι η ανάπτυξη χρώματος μέσω μιας ενζυματικής αντίδρασης. Από την άλλη πλευρά, το ELFA είναι ένας άλλος τύπος ανοσοπροσδιορισμού που ανιχνεύει την παρουσία μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης στο δείγμα με την ανάπτυξη φθορισμού μέσω μιας ενζυματικής αντίδρασης. Επομένως, η κύρια διαφορά μεταξύ ELISA και ELFA είναι ο τύπος του υποστρώματος στην ενζυματική αντίδραση.