Ερευνητές:Πώς πιστοποιείτε τις μη ανθρώπινες κυτταρικές σας σειρές;
1. Μορφολογική ανάλυση :Αυτό περιλαμβάνει την εξέταση της κυτταρικής σειράς κάτω από ένα μικροσκόπιο για να παρατηρηθεί το σχήμα, το μέγεθος και τα χαρακτηριστικά ανάπτυξης. Ενώ η μορφολογική ανάλυση μπορεί να είναι χρήσιμη για τον εντοπισμό γενικών χαρακτηριστικών μιας κυτταρικής σειράς, δεν αρκεί πάντα για οριστικό έλεγχο ταυτότητας.
2. Ανοσοφαινοτυπία :Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί αντισώματα για την ανίχνευση της παρουσίας ή της απουσίας ειδικών επιφανειακών δεικτών ή ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών που είναι χαρακτηριστικές ενός συγκεκριμένου κυτταρικού τύπου. Η ανοσοφαινοτυπία μπορεί να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας τεχνικές όπως κυτταρομετρία ροής ή ανοσοκυτταροχημεία.
3. karyotyping :Αυτή η τεχνική περιλαμβάνει την ανάλυση του αριθμού χρωμοσωμάτων και της δομής μιας κυτταρικής σειράς. Η καρυοτυπία μπορεί να εντοπίσει χρωμοσωμικές ανωμαλίες ή αλλαγές που μπορεί να υποδηλώνουν μόλυνση ή εσφαλμένη αναγνώριση.
4. DNA δακτυλικά αποτυπώματα :Αυτή η μέθοδος περιλαμβάνει την ανάλυση των μοναδικών μοτίβων DNA μιας κυτταρικής γραμμής χρησιμοποιώντας τεχνικές όπως η ανάλυση του προφίλ επανάληψης διαδοχικής επανάληψης (STR) ή της ανάλυσης μεμονωμένων νουκλεοτιδίων (SNP). Η αποτύπωση δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA μπορεί να παρέχει υψηλό επίπεδο διακρίσεων και χρησιμοποιείται ευρέως για τον έλεγχο ταυτότητας κυτταρικής γραμμής.
5. Ειδικά PCR :Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) για την ενίσχυση συγκεκριμένων αλληλουχιών DNA που είναι μοναδικές για το είδος προέλευσης της κυτταρικής σειράς. Η ειδική PCR ειδικά μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση διασταυρούμενης μόλυνσης ή εσφαλμένης ταυτοποίησης των κυτταρικών σειρών.
6. Ανάλυση ισοενζύμου :Αυτή η τεχνική περιλαμβάνει την ανάλυση της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας των ισοενζύμων, οι οποίες είναι παραλλαγές των ενζύμων που διαφέρουν στη μοριακή δομή και τη λειτουργία τους. Η ανάλυση ισοενζύμου μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της μόλυνσης των κυτταρικών γραμμών ή της εσφαλμένης ταυτοποίησης με βάση τις διαφορές στα πρότυπα ισοενζύμου.
7. Δοκιμές μυκόπλας :Το Mycoplasma είναι ένας τύπος βακτηρίων που μπορεί να μολύνει τις κυτταρικές καλλιέργειες και να επηρεάσει τη συμπεριφορά τους και τα πειραματικά αποτελέσματα. Η δοκιμή Mycoplasma είναι απαραίτητη για να διασφαλιστεί ότι οι κυτταρικές σειρές είναι απαλλαγμένες από μόλυνση μυκοπλάσματος.
Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι η επιλογή της μεθόδου ελέγχου ταυτότητας εξαρτάται από τη συγκεκριμένη κυτταρική σειρά και το επίπεδο ελέγχου ταυτότητας. Ορισμένες κυτταρικές σειρές ενδέχεται να απαιτούν πολλαπλές μεθόδους ελέγχου ταυτότητας για την εξασφάλιση αξιόπιστης ταυτοποίησης και ελέγχου ποιότητας. Επιπλέον, η κατάλληλη τεκμηρίωση και η τήρηση αρχείων της διαδικασίας ελέγχου ταυτότητας είναι ζωτικής σημασίας για τη διατήρηση της ακεραιότητας των κυτταρικών σειρών και την εξασφάλιση της αναπαραγωγιμότητας στην έρευνα.
