Γιατί οι φρέσκοι βακτηριακοί καλλιέργειες πρέπει να χρησιμοποιούνται σε λεκέ gram;
Δομή κυτταρικού τοιχώματος:Η διαδικασία χρώσης Gram διαφοροποιεί τα βακτήρια σε δύο ομάδες:Gram-θετικά και Gram-αρνητικά, βασισμένα στις δομικές διαφορές στα κυτταρικά τους τοιχώματα. Τα θετικά με Gram βακτήρια έχουν ένα παχύ στρώμα πεπτιδογλυκάνης στα κυτταρικά τους τοιχώματα, ενώ τα Gram-αρνητικά βακτήρια έχουν ένα λεπτότερο στρώμα πεπτιδογλυκάνης και μια πρόσθετη εξωτερική μεμβράνη.
Ηλικία του πολιτισμού:Καθώς οι βακτηριακές καλλιέργειες ηλικίας, η σύνθεση και η δομή των κυττάρων τους μπορεί να αλλάξουν. Οι μεγαλύτερες καλλιέργειες μπορεί να έχουν διαφορετικές ποσότητες πεπτιδογλυκάνης, οι οποίες μπορούν να επηρεάσουν τον τρόπο με τον οποίο αλληλεπιδρούν με τα αντιδραστήρια λεκέδων Gram. Αυτό μπορεί να οδηγήσει σε ανακριβή αποτελέσματα χρώσης, καθιστώντας δύσκολη τη διάκριση μεταξύ Gram-θετικών και Gram-αρνητικών βακτηρίων.
Κυτταρική διαίρεση:Η διαίρεση των βακτηριακών κυττάρων μπορεί να έχει διαφορετικές δομές κυτταρικού τοιχώματος σε σύγκριση με τα μη διαγώγιμα κύτταρα. Κατά τη διάρκεια της κυτταρικής διαίρεσης, η διαδικασία σύνθεσης κυτταρικού τοιχώματος μπορεί να διαταραχθεί, οδηγώντας σε παραλλαγές στο στρώμα πεπτιδογλυκάνης. Αυτές οι διαφορές μπορούν να επηρεάσουν τις ιδιότητες χρώσης των βακτηρίων, με αποτέλεσμα τα ασυνεπή αποτελέσματα χρώσης Gram.
ΑΥΤΟΛΛΑΤΟΣ:Η βακτηριακή αυτοόλυση αναφέρεται στην αυτοκαταστροφή των βακτηριακών κυττάρων λόγω της δράσης των δικών τους ενζύμων. Καθώς οι πολιτισμοί γερνούν, ο κίνδυνος αυτοπολύσεων αυξάνεται. Η αυτόλυση μπορεί να προκαλέσει την αποικοδόμηση των συστατικών του κυτταρικού τοιχώματος, καθιστώντας πιο δύσκολο να διαφοροποιηθεί το Gram-θετικό από τα Gram-αρνητικά βακτήρια.
Βαρύθμιση υποβάθρου:Με παλαιότερους πολιτισμούς, υπάρχει αυξημένη πιθανότητα μη ειδικής χρώσης, οδηγώντας σε υψηλότερο χρώμα φόντου. Αυτή η χρώση υποβάθρου μπορεί να επηρεάσει την ακριβή απεικόνιση και την ερμηνεία των διαφανειών που έχουν χρωματιστεί με Gram, καθιστώντας την πρόκληση για τον εντοπισμό των βακτηρίων σωστά.
Ως εκ τούτου, συνιστάται να χρησιμοποιείτε νέες βακτηριακές καλλιέργειες για χρώση Gram για να εξασφαλιστεί η ακρίβεια και η αξιοπιστία της δοκιμής. Οι φρέσκες καλλιέργειες έχουν βέλτιστες δομές κυτταρικού τοιχώματος, είναι λιγότερο επιρρεπείς στην αυτοόλυση και παρέχουν σαφέστερη διάκριση μεταξύ των θετικών Gram και των αρνητικών Gram βακτηρίων.
