Λειτουργεί η διαδικασία λεκέδων Gram για όλα τα βακτήρια;
Γενικά, τα θετικά με Gram βακτήρια διατηρούν την κρυστάλλινη ιώδη βαφής λόγω της παρουσίας ενός παχύ στρώματος πεπτιδογλυκάνης στο κυτταρικό τους τοίχωμα. Αυτό το στρώμα είναι υπεύθυνο για το θετικό φορτίο, επιτρέποντας σε αυτά τα βακτηρίδια να διατηρούν το σύμπλοκο κρυσταλλικού ιώδους-ιωδίου που σχηματίζεται κατά τη διάρκεια της διαδικασίας χρώσης. Στη συνέχεια, τα Gram-θετικά κύτταρα εμφανίζονται σκούρα μοβ ή μπλε όταν παρατηρούνται κάτω από μικροσκόπιο.
Από την άλλη πλευρά, τα Gram-αρνητικά βακτήρια διαθέτουν ένα λεπτότερο στρώμα πεπτιδογλυκάνης και μια πρόσθετη εξωτερική μεμβράνη. Αυτή η διαφορά στη δομή του κυτταρικού τοιχώματος οδηγεί σε απώλεια της κρυστάλλινης ιώδους βαφής κατά τη διάρκεια του σταδίου πλύσης αλκοόλ του πρωτοκόλλου χρώσης Gram. Κατά συνέπεια, τα Gram-αρνητικά βακτηρίδια δεν διατηρούν το σύμπλοκο κρυσταλλικού ιώδους-ιωδίου και στη συνέχεια αναλαμβάνουν το αντίθετο, συνήθως σαρφρανίνη. Ως αποτέλεσμα, τα Gram-αρνητικά κύτταρα εμφανίζονται κόκκινα ή ροζ όταν παρατηρούνται κάτω από το μικροσκόπιο.
Ενώ η διαδικασία λεκέδων Gram διαφοροποιεί αποτελεσματικά μεταξύ των θετικών Gram και των Gram-αρνητικών βακτηρίων, υπάρχουν μερικές εξαιρέσεις όπου η διαδικασία μπορεί να παράγει απροσδόκητα αποτελέσματα. Αυτές οι εξαιρέσεις περιλαμβάνουν:
Βακτήρια Acid-Fast:Ορισμένα βακτήρια, όπως αυτά που ανήκουν στο γένος Mycobacterium, έχουν ένα κηρώδες κυτταρικό τοίχωμα που εμποδίζει τη βαφή του κρυσταλλικού ιώδους από τη διείσδυση των κυττάρων. Ως αποτέλεσμα, αυτά τα βακτηρίδια δεν απεικονίζονται εύκολα με τη διαδικασία λεκέδων Gram και απαιτούν ειδικές τεχνικές χρώσης, όπως η κηλίδα Ziehl-Neelsen, που πρόκειται να παρατηρηθεί.
Gram-μεταβλητά βακτηρίδια:Ορισμένα βακτηριακά είδη μπορεί να εμφανίζουν διακυμάνσεις στα χαρακτηριστικά χρώσης Gram ανάλογα με τις συνθήκες ανάπτυξης ή τα αναπτυξιακά τους στάδια. Για παράδειγμα, ορισμένα βακτήρια μπορεί να είναι θετικά Gram σε ορισμένα στάδια του κύκλου ζωής τους και Gram-αρνητικών σε άλλα.
Ασυνήθιστα χρωματισμένα βακτηρίδια:Σπάνια, ορισμένα βακτηριακά είδη μπορεί να εμφανίζουν ασυνήθιστα αποτελέσματα χρώσης Gram λόγω μοναδικών συνθέσεων κυτταρικού τοιχώματος ή μεταβολών στη χημική τους σύνθεση. Αυτά τα βακτηρίδια μπορεί να εμφανίζονται εν μέρει χρωματισμένα ή ενδιάμεσα στην αντίδραση χρώσης τους, καθιστώντας την ταξινόμησή τους είτε ως Gram-θετική είτε ως Gram-αρνητική πρόκληση.
Συνοπτικά, η διαδικασία λεκέδων Gram είναι μια αξιόπιστη τεχνική που διαφοροποιεί αποτελεσματικά μεταξύ των περισσότερων Gram-θετικών και Gram-αρνητικών βακτηρίων που βασίζονται σε διαφορές στις δομές του κυτταρικού τοιχώματος. Ωστόσο, υπάρχουν εξαιρέσεις όπου ορισμένα βακτηριακά είδη ενδέχεται να μην συμμορφώνονται με τα τυπικά Gram-θετικά ή Gram-αρνητικά πρότυπα χρώσης, που απαιτούν εναλλακτικές μεθόδους χρώσης ή λεπτομερή ανάλυση για ακριβή ταξινόμηση.
