Πώς χειρίζεται το DNA;
ένζυμα περιορισμού :Αυτά τα ένζυμα αναγνωρίζουν και κόβουν το DNA σε συγκεκριμένες παλινδρομικές αλληλουχίες. Επιλέγοντας τα κατάλληλα ένζυμα περιορισμού, το DNA μπορεί να κοπεί σε συγκεκριμένα θραύσματα.
σύνδεση DNA :Τα θραύσματα DNA μπορούν να ενώνονται μαζί χρησιμοποιώντας ένα ένζυμο που ονομάζεται Ligase DNA. Αυτή η διαδικασία είναι ζωτικής σημασίας για την κλωνοποίηση γονιδίων και άλλες τεχνικές χειρισμού του DNA.
Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) :Η PCR είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για την ενίσχυση μιας συγκεκριμένης περιοχής DNA. Περιλαμβάνει επαναλαμβανόμενους κύκλους θέρμανσης και ψύξης του δείγματος DNA, επιτρέποντας στην πολυμεράση DNA να επεκτείνει τους εκκινητές και να αυξάνει εκθετικά τον αριθμό των αντιγράφων DNA.
ηλεκτροφόρηση πηκτής :Αυτή η τεχνική χωρίζει θραύσματα DNA με βάση το μέγεθός τους. Τα δείγματα ϋΝΑ φορτώνονται σε ένα πήκτωμα και εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό ρεύμα, προκαλώντας τα θραύσματα DNA που φορτίζονται αρνητικά από το πήκτωμα. Τα μικρότερα θραύσματα κινούνται ταχύτερα, επιτρέποντας τον διαχωρισμό και την απεικόνιση διαφορετικών θραυσμάτων DNA.
αλληλουχία DNA :Η αλληλουχία DNA καθορίζει τη σειρά των νουκλεοτιδίων σε ένα μόριο DNA. Διάφορες μέθοδοι, όπως η αλληλουχία Sanger και οι τεχνολογίες αλληλουχίας επόμενης γενιάς (NGS), χρησιμοποιούνται για την απόκτηση πληροφοριών αλληλουχίας DNA.
κλωνοποίηση γονιδίων :Η κλωνοποίηση γονιδίων περιλαμβάνει την απομόνωση ενός συγκεκριμένου γονιδίου και την τοποθέτησή του σε ένα φορέα κλωνοποίησης, όπως ένα πλασμίδιο ή ιό. Το ανασυνδυασμένο DNA μπορεί στη συνέχεια να διαδοθεί σε έναν οργανισμό ξενιστή για περαιτέρω μελέτη ή παραγωγή της κωδικοποιημένης πρωτεΐνης.
Γενετική μηχανική :Αυτό περιλαμβάνει ένα ευρύ φάσμα τεχνικών που χρησιμοποιούνται για την αλλαγή του γενετικού υλικού των οργανισμών. Η γενετική μηχανική περιλαμβάνει χειρισμό γονιδίων, εισαγωγή ή διαγραφή ειδικών αλληλουχιών ϋΝΑ και τροποποίηση της γονιδιακής έκφρασης για την επίτευξη των επιθυμητών χαρακτηριστικών ή την παραγωγή ειδικών πρωτεϊνών.
Αυτές οι μέθοδοι και τεχνικές έχουν φέρει επανάσταση στο πεδίο της μοριακής βιολογίας και επέτρεψαν στους ερευνητές να μελετήσουν, να τροποποιήσουν και να κατανοήσουν τις λειτουργίες του DNA σε βαθύ επίπεδο.