Πού τοποθετείται το DNA σε συσκευή ηλεκτροφοσκοπίας πηκτής;
1. Παρασκευή DNA:
- Το DNA εκχυλίζεται από κύτταρα και στη συνέχεια αφομοιώνεται με ένζυμα περιορισμού για τη δημιουργία θραυσμάτων ποικίλων μεγεθών.
- Αυτά τα θραύσματα στη συνέχεια αναμιγνύονται με βαφή φόρτωσης, η οποία βοηθά στην απεικόνιση του DNA και παρακολουθεί την κίνηση του κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφόρησης.
2. Φόρτωση φρεατίων:
- Το παρασκευασμένο δείγμα DNA (με βαφή φόρτωσης) είναι φορτωμένο προσεκτικά σε πηγάδια Στην κορυφή του πηκτώματος. Αυτά τα πηγάδια είναι μικρές κοιλότητες που δημιουργούνται στο πήκτωμα, συνήθως κοντά στο αρνητικό ηλεκτρόδιο.
3. ηλεκτροφόρηση πηκτής:
- Το πήκτωμα βυθίζεται σε ένα ρυθμιστικό διάλυμα εντός της συσκευής ηλεκτροφόρησης, που συνδέεται με ένα ηλεκτρικό ρεύμα.
- Το DNA είναι αρνητικά φορτισμένο, έτσι κινείται προς το θετικό ηλεκτρόδιο Στο άλλο άκρο της συσκευής.
4. Διαχωρισμός:
- Το πήκτωμα δρα σαν κόσκινο, επιτρέποντας σε μικρότερα θραύσματα DNA να μετακινούνται πιο εύκολα από τα μεγαλύτερα θραύσματα. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα το DNA να διαχωρίζεται κατά μέγεθος, με τα μικρότερα θραύσματα να ταξιδεύουν πιο μακρύτερα.
Επομένως, το DNA φορτώνεται στα πηγάδια στην κορυφή του πηκτώματος, που δεν τοποθετείται άμεσα στη συσκευή ηλεκτροφόρησης.