Ποιοι οργανισμοί χρησιμοποίησαν ο Cohen και ο Boyer στο πείραμά τους;
* e. Coli βακτήρια: Αυτό χρησίμευσε ως οργανισμός υποδοχής.
* πλασμίδιο: Αυτό ήταν ένα μικρό, κυκλικό κομμάτι DNA που απομονώνονται από το Ε. Coli. Χρησιμοποίησαν αυτό το πλασμίδιο ως φορέα για να μεταφέρουν το επιθυμητό γονίδιο.
* γονίδιο αντίστασης αντιβιοτικών: Αυτό ήταν ένα γονίδιο από έναν άλλο οργανισμό (πιθανώς άλλο βακτήριο) που παρείχε αντίσταση σε ένα συγκεκριμένο αντιβιοτικό. Αυτό το γονίδιο εισήχθη στο πλασμίδιο.
Εδώ είναι η βασική κατανομή του πειράματος:
1. Απομόνωση: Απώθησαν το πλασμίδιο DNA από Ε. Coli και το γονίδιο αντοχής στα αντιβιοτικά από άλλο οργανισμό.
2. Χρησιμοποίησαν ένζυμα περιορισμού για να κόψουν τόσο το πλασμίδιο όσο και το γονίδιο αντοχής στα αντιβιοτικά σε συγκεκριμένες θέσεις.
3. Αποσύνδεση: Στη συνέχεια εντάχθηκαν στα κομμένα άκρα του πλασμιδίου και του γονιδίου αντοχής στα αντιβιοτικά χρησιμοποιώντας λιγάση ϋΝΑ, δημιουργώντας ένα ανασυνδυασμένο πλασμίδιο.
4. Μετασχηματισμός: Εισήγαγαν το ανασυνδυασμένο πλασμίδιο σε Ε. Coli.
5. Επιλογή: Χρησιμοποίησαν αντιβιοτικά για να επιλέξουν για το Ε. Coli που είχαν πάρει με επιτυχία το ανασυνδυασμένο πλασμίδιο.
Αυτό το πείραμα κατέδειξε τη σκοπιμότητα της κλωνοποίησης γονιδίων , μια θεμελιώδη τεχνική στη σύγχρονη βιοτεχνολογία.
