Τι είναι η γενική δοκιμή για την πρωτεΐνη;
1. Η αρχή:
* Η δοκιμή Biuret βασίζεται στην αντίδραση μεταξύ των ιόντων χαλκού (Cu2⁺) σε ένα αλκαλικό διάλυμα με πεπτιδικούς δεσμούς που βρίσκονται σε πρωτεΐνες.
* Οι δεσμοί πεπτιδίων είναι οι δεσμοί μεταξύ αμινοξέων, οι οποίες αποτελούν πρωτεΐνες.
* Όταν τα ιόντα χαλκού δεσμεύονται στους πεπτιδικούς δεσμούς, σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα που απορροφά το φως σε ένα συγκεκριμένο μήκος κύματος, παράγοντας μια ξεχωριστή αλλαγή χρώματος.
2. Διαδικασία:
* Προσθέστε μια μικρή ποσότητα του άγνωστου δείγματος (υγρό ή στερεό) σε δοκιμαστικό σωλήνα.
* Προσθέστε μερικές σταγόνες αντιδραστηρίου Biuret στο δείγμα. Το αντιδραστήριο Biuret είναι ένα διάλυμα που περιέχει θειικό χαλκό και υδροξείδιο του νατρίου.
* Ανακατέψτε απαλά τα περιεχόμενα του δοκιμαστικού σωλήνα.
* Παρατηρήστε την αλλαγή χρώματος.
3. Ερμηνεία αποτελεσμάτων:
* θετικό αποτέλεσμα: Εάν η λύση μετατραπεί βιολετί ή μοβ , υποδεικνύει την παρουσία πρωτεϊνών.
* αρνητικό αποτέλεσμα: Εάν το διάλυμα παραμένει μπλε ή δεν παρουσιάζει σημαντική αλλαγή χρώματος, υποδηλώνει την απουσία πρωτεϊνών.
4. Περιορισμοί:
* Η δοκιμή Biuret δεν είναι ειδική για τις πρωτεΐνες και μπορεί επίσης να δώσει ένα θετικό αποτέλεσμα για ενώσεις που περιέχουν πεπτιδικούς δεσμούς, όπως τα πεπτίδια και ορισμένα άλλα μόρια.
* Η δοκιμή μπορεί να μην είναι αρκετά ευαίσθητη ώστε να ανιχνεύει πολύ χαμηλές συγκεντρώσεις πρωτεϊνών.
5. Άλλες δοκιμές πρωτεϊνών:
Ενώ χρησιμοποιείται ευρέως η δοκιμή Biuret, υπάρχουν επίσης άλλες δοκιμές πρωτεΐνης, όπως:
* Δοκιμή ninhydrin: Ανιχνεύει την παρουσία αμινοξέων, τα οποία είναι τα δομικά στοιχεία πρωτεϊνών.
* Xanthoproteic Test: Ανιχνεύει την παρουσία αρωματικών αμινοξέων, όπως τυροσίνη και τρυπτοφάνη.
* Δοκιμή του Millon: Ανιχνεύει την παρουσία τυροσίνης, ενός αμινοξέος που βρίσκεται σε πολλές πρωτεΐνες.
Η επιλογή της δοκιμής εξαρτάται από τη διερεύνηση της συγκεκριμένης πρωτεΐνης και το επιθυμητό επίπεδο ευαισθησίας.
