Τι αντιπροσωπεύουν οι ζώνες DNA στην ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης;
Δείτε πώς λειτουργεί:
* Το DNA χρεώνεται αρνητικά: Αυτό του επιτρέπει να μεταναστεύει προς το θετικό ηλεκτρόδιο όταν εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό ρεύμα.
* Το Gel Agarose λειτουργεί ως κόσκινο: Μικρότερα θραύσματα DNA κινούνται μέσα από τους πόρους του πηκτώματος πιο εύκολα από τα μεγαλύτερα θραύσματα.
* Διαχωρισμός κατά μέγεθος: Αυτό έχει ως αποτέλεσμα τα θραύσματα DNA διαφορετικού μεγέθους που μεταναστεύουν με διαφορετικές ταχύτητες, οδηγώντας σε ξεχωριστές ζώνες που μπορούν να απεικονιστούν.
Τι αντιπροσωπεύει κάθε μπάντα:
* θέση της ζώνης: Η θέση μιας ζώνης στο πήκτωμα υποδεικνύει το μέγεθος του θραύσματος DNA. Μικρότερα θραύσματα μεταναστεύουν πιο κάτω από το πήκτωμα, ενώ τα μεγαλύτερα θραύσματα παραμένουν πιο κοντά στο σημείο εκκίνησης.
* ένταση της μπάντας: Η ένταση μιας ζώνης αντικατοπτρίζει την ποσότητα του DNA σε αυτό το κομμάτι. Μια φωτεινότερη ζώνη υποδεικνύει περισσότερα μόρια DNA αυτού του μεγέθους.
* Αριθμός ζωνών: Ο αριθμός των ξεχωριστών ζωνών αντιπροσωπεύει τον αριθμό των διαφορετικών θραυσμάτων DNA που υπάρχουν στο δείγμα.
Εφαρμογές:
Η ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης χρησιμοποιείται ευρέως στη μοριακή βιολογία για διάφορους σκοπούς, όπως:
* Ανάλυση θραυσμάτων DNA: Ανάλυση του μεγέθους των θραυσμάτων DNA μετά την πέψη του ενζύμου περιορισμού.
* Ανάλυση προϊόντων PCR: Επιβεβαιώνοντας το μέγεθος και την παρουσία προϊόντων PCR.
* δακτυλικά αποτυπώματα DNA: Συγκρίνοντας τα προφίλ DNA για τον έλεγχο ταυτοποίησης ή της πατρότητας.
* κλωνοποίηση γονιδίων: Επιλογή και ανάλυση θραυσμάτων DNA για εισαγωγή σε φορείς.
Συνολικά, οι ζώνες ϋΝΑ σε πηκτή αγαρόζης παρέχουν πολύτιμες πληροφορίες σχετικά με το μέγεθος, την ποσότητα και την ποικιλομορφία των θραυσμάτων DNA σε ένα δείγμα.
