Γιατί η θολερότητα δεν είναι ένα μέτρο Accuarte βιώσιμων βακτηρίων σε μια κουλτούρα;
* Η θολερότητα μετρά τον συνολικό αριθμό κυττάρων, όχι μόνο τα ζωντανά κύτταρα: Η θολερότητα είναι μια μέτρηση του πόσο φως είναι διάσπαρτα από τα σωματίδια σε ένα διάλυμα. Ενώ τα βακτήρια συμβάλλουν στην θολερότητα, τα νεκρά κύτταρα, τα κυτταρικά συντρίμμια και άλλα σωματίδια.
* Τα διαφορετικά βακτήρια έχουν διαφορετικά μεγέθη και σχήματα: Μια καλλιέργεια με υψηλή θολερότητα θα μπορούσε να οφείλεται σε μεγάλο αριθμό μικρών βακτηρίων ή σε μικρότερο αριθμό μεγαλύτερων βακτηρίων. Αυτό καθιστά δύσκολο να συσχετιστούν άμεσα με τον αριθμό των βιώσιμων βακτηρίων.
* Η φάση ανάπτυξης έχει σημασία: Τα βακτήρια αναπτύσσονται σε φάσεις και η σχέση μεταξύ θολερότητας και βιώσιμου αριθμού κυττάρων μπορεί να διαφέρει σημαντικά κατά τη διάρκεια διαφορετικών φάσεων. Για παράδειγμα, στη στατική φάση, ο κυτταρικός θάνατος μπορεί να εξισορροπήσει την κυτταρική διαίρεση, οδηγώντας σε συνεχή θολερότητα, παρόλο που ο αριθμός των βιώσιμων βακτηρίων μπορεί να μειωθεί.
Επομένως, ενώ η θολερότητα μπορεί να είναι ένας χρήσιμος δείκτης της βακτηριακής ανάπτυξης, δεν είναι ένα αξιόπιστο μέτρο βιώσιμων βακτηρίων.
Για να προσδιορίσετε με ακρίβεια τον αριθμό των βιώσιμων βακτηρίων, πρέπει να χρησιμοποιήσετε τεχνικές όπως:
* Μετράει η πλάκα: Αυτό περιλαμβάνει την αραίωση της καλλιέργειας και την επένδυση σε άγαρ. Οι αποικίες που αναπτύσσονται αντιπροσωπεύουν βιώσιμα βακτηρίδια.
* Άμεσες μικροσκοπικές μετρήσεις: Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί ένα μικροσκόπιο για να μετρήσει τον αριθμό των βακτηρίων σε έναν συγκεκριμένο όγκο καλλιέργειας. Ωστόσο, αυτή η μέθοδος δεν διακρίνει μεταξύ ζωντανών και νεκρών κυττάρων.
* Κυομετρία ροής: Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί λέιζερ για να μετρήσει και να εντοπίσει τα κύτταρα με βάση το μέγεθος, το σχήμα και τον φθορισμό τους. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διάκριση μεταξύ ζωντανών και νεκρών κυττάρων.
Συνοπτικά, η θολερότητα παρέχει μια γενική ιδέα της βακτηριακής ανάπτυξης, αλλά δεν αντικατοπτρίζει με ακρίβεια τον αριθμό των βιώσιμων βακτηρίων. Για να λάβετε ένα ακριβές μέτρο βιώσιμων βακτηρίων, πρέπει να χρησιμοποιήσετε πιο συγκεκριμένες τεχνικές.
