Ποιο είναι το ένζυμο που συνθετικό DNA που χρησιμοποιείται σε PCR που το διακρίνει από το ισοδύναμο εκτελεί την ίδια λειτουργία τα κύτταρα μας ή τα περισσότερα βακτήρια;
Εδώ είναι γιατί:
* Η PCR απαιτεί υψηλές θερμοκρασίες. Η διαδικασία PCR περιλαμβάνει κύκλους θέρμανσης και ψύξης σε μετρώματα DNA, ανόπτησης εκκινητές και επεκτείνει το νέο κλώνο DNA. Αυτή η διαδικασία απαιτεί ένα ένζυμο που μπορεί να αντέξει αυτές τις υψηλές θερμοκρασίες χωρίς να μετουσιώσει τον εαυτό του.
* Οι κυτταρικές πολυμεράσες ϋΝΑ δεν είναι θερμοσταθερές. Οι πολυμεράσες ϋΝΑ που βρίσκονται στα κύτταρα μας και τα περισσότερα βακτήρια βελτιστοποιούνται για την φυσιολογική κυτταρική θερμοκρασία. Θα υποβαθμίσουν γρήγορα τις υψηλές θερμοκρασίες που χρησιμοποιούνται σε PCR.
Επομένως, η PCR χρησιμοποιεί μια θερμοσταθερή πολυμεράση DNA , πιο συχνά Taq πολυμεράση , απομονωμένη από το θερμοφιλικό βακτήριο *Thermus aquaticus *. Αυτό το ένζυμο μπορεί να αντέξει τις υψηλές θερμοκρασίες που απαιτούνται για να μειώσει το πρότυπο DNA χωρίς να χάσει τη δραστηριότητά του.
Εδώ είναι ένας πίνακας που συνοψίζει τις βασικές διαφορές:
| Χαρακτηριστικό | PCR DNA πολυμεράση (π.χ., TAQ) | Κυτταρικό ϋΝΑ πολυμεράσης |
| ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
| Θερμοσυστικότητα | Υψηλή, μπορεί να αντέξει τους 95 ° C | Χαμηλές, μετουσιώσεις σε υψηλές θερμοκρασίες |
| Πηγή | Θερμοφιλικά βακτήρια | Ευκαρυώτες/προκαρυωτικά |
| χρησιμοποιείται σε PCR | Ναι | Όχι |
Συνοπτικά, η θερμοσταθερότητα της πολυμεράσης TAQ είναι το κρίσιμο χαρακτηριστικό που του επιτρέπει να λειτουργεί στις σκληρές συνθήκες της PCR, διακρίνοντας την από κυτταρικές πολυμεράσες DNA.
