Ένα ανασυνδυασμένο πλασμίδιο μπαίνει μέσα σε ένα βακτηριακό κύτταρο;
Εδώ είναι μια κατανομή:
1. Προετοιμασία: Τα βακτηριακά κύτταρα αντιμετωπίζονται με ένα διάλυμα που καθιστά τα κυτταρικά τους τοιχώματα πιο διαπερατά. Αυτό γίνεται συχνά με χλωριούχο ασβέστιο, το οποίο βοηθά το DNA να εισέλθει στο κύτταρο.
2. Εισαγωγή: Το ανασυνδυασμένο ϋΝΑ πλασμίδιο στη συνέχεια προστίθεται στα παρασκευασμένα βακτηριακά κύτταρα. Το πλασμίδιο DNA μπορεί να εισαχθεί χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους, συμπεριλαμβανομένων:
* Θερμικό σοκ: Τα κύτταρα και το πλασμίδιο DNA αναμειγνύονται και στη συνέχεια υποβάλλονται σε ένα σύντομο θερμικό σοκ, το οποίο βοηθά το DNA να εισέλθει στα κύτταρα.
* Ηλεκτροδιάκριση: Ένας σύντομος ηλεκτρικός παλμός εφαρμόζεται στα κύτταρα, τα οποία δημιουργούν προσωρινούς πόρους στην κυτταρική μεμβράνη που επιτρέπει στο πλασμίδιο να εισέλθει.
3. Μετασχηματισμός: Μόλις το πλασμίδιο βρίσκεται μέσα στο κελί, τα βακτήρια μπορούν να αναλάβουν το DNA και να το ενσωματώσουν στο δικό τους γονιδίωμα. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται μετασχηματισμός.
4. Επιλογή: Στη συνέχεια, τα μετασχηματισμένα βακτήρια επιλέγονται για τη χρήση μιας τεχνικής που ονομάζεται επιλογή αντιβιοτικών. Τα πλασμίδια περιέχουν τυπικά ένα γονίδιο αντίστασης αντιβιοτικών, έτσι μόνο τα βακτήρια που έχουν πάρει το πλασμίδιο θα μπορούν να αναπτυχθούν σε ένα μέσο που περιέχει το αντιβιοτικό.
Αυτή η διαδικασία επιτρέπει στους ερευνητές να εισάγουν συγκεκριμένα γονίδια σε βακτήρια, επιτρέποντάς τους να παράγουν επιθυμητές πρωτεΐνες ή ενώσεις, μεταξύ άλλων εφαρμογών.
