Ποιο γονίδιο καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση βακτηρίων που φέρουν πλασμίδιο;
Εδώ γιατί δεν υπάρχει ενιαίο γονίδιο για ταυτοποίηση:
* Διαφορετικότητα πλασμιδίου: Τα πλασμίδια είναι διαφορετικά, έρχονται σε διάφορα μεγέθη και μεταφέρουν διαφορετικά γονίδια.
* ποικιλία γονιδίων δείκτη: Τα πλασμίδια περιλαμβάνουν συχνά γονίδια που παρέχουν επιλεκτικά πλεονεκτήματα στα βακτήρια, όπως τα γονίδια αντοχής στα αντιβιοτικά. Αυτά τα γονίδια δείκτη χρησιμεύουν ως δείκτες πλασμιδικής παρουσίας.
* Επιλεγμένοι δείκτες: Ορισμένα συνήθως χρησιμοποιούμενα γονίδια δείκτη περιλαμβάνουν:
* γονίδια αντοχής στα αντιβιοτικά: Αυτά επιτρέπουν στα βακτήρια να αναπτυχθούν παρουσία συγκεκριμένων αντιβιοτικών, διακρίνοντας τα από τα βακτήρια που δεν έχουν το πλασμίδιο.
* γονίδια αναφοράς: Αυτά τα γονίδια κωδικοποιούν πρωτεΐνες που παράγουν εύκολα ανιχνεύσιμα σήματα, όπως μεταβολές φθορισμού ή χρώματος.
Πώς να ταυτοποιήσετε βακτήρια με πλασμίδια:
1. Επιλογή: Καλλιεργήστε τα βακτηρίδια στα μέσα που περιέχουν ένα αντιβιοτικό. Μόνο τα βακτήρια που φέρουν το πλασμίδιο με το αντίστοιχο γονίδιο αντίστασης θα επιβιώσουν και θα αναπτυχθούν.
2. Προβολή: Χρησιμοποιήστε τεχνικές όπως η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) για την ενίσχυση συγκεκριμένων γονιδίων δεικτών που είναι γνωστό ότι υπάρχουν σε ένα συγκεκριμένο πλασμίδιο.
3. Μοριακή ανάλυση: Χρησιμοποιήστε τεχνικές όπως η πέψη του ενζύμου περιορισμού ή η αλληλουχία για να προσδιορίσετε το ίδιο το πλασμίδιο.
Συνοπτικά: Δεν είναι ένα μόνο γονίδιο, αλλά ένας συνδυασμός γονιδίων δεικτών, τεχνικών επιλογής και μοριακής ανάλυσης που βοηθούν στον εντοπισμό βακτηρίων που μεταφέρουν πλασμίδια.