Ποια είναι η δράση των ενζύμων Macerozymes onozuka κυτταρινάση σορβιτόλη και μαννιτόλη σε πρωτοτοπλάστες απομόνωσης ενζυματικής μεθόδου;
Απομόνωση πρωτοπλάστες:μια γενική επισκόπηση
Οι πρωτοπλάστες είναι φυτικά κύτταρα με τα κυτταρικά τους τοιχώματα που έχουν αφαιρεθεί. Αυτό είναι χρήσιμο για διάφορους ερευνητικούς σκοπούς:
* Γενετική μηχανική: Εισαγάγετε τα νέα γονίδια πιο εύκολα.
* Cell Fusion: Δημιουργήστε υβριδικά κύτταρα με επιθυμητά χαρακτηριστικά.
* Κυτταρική καλλιέργεια: Μελετήστε τη συμπεριφορά των κυττάρων χωρίς την παρέμβαση του τοίχου.
Ένζυμα που εμπλέκονται σε απομόνωση πρωτοπλάστες
1. Macerozyme:
* Αυτό το ένζυμο διασπάται το μεσαίο έλασμα, το στρώμα που τσιμέντο φυτών κυττάρων μαζί. Αποδυναμώνει τη δομή του κυτταρικού τοιχώματος.
* Χρησιμοποιείται συχνά σε συνδυασμό με κυτταρινάσες.
2. onozuka cellulase:
* Αυτός είναι ένας τύπος κυτταρινάσης, ένα ένζυμο που υποβαθμίζει την κυτταρίνη.
* Η κυτταρίνη είναι το κύριο συστατικό των κυτταρικών τοιχωμάτων των φυτών.
* Η κυτταρινάση Onozuka σπάει αποτελεσματικά τις ίνες κυτταρίνης, εξασθενίζοντας περαιτέρω το κυτταρικό τοίχωμα.
3. σορβιτόλη και μαννιτόλη:
* Αυτά δεν είναι ένζυμα αλλά οσμωτικά σταθεροποιητές .
* Προστίθενται στη λύση απομόνωσης για τη διατήρηση της οσμωτικής ισορροπίας μέσα στον πρωτόοπλαστο.
* Αυτό εμποδίζει την έκρηξη του πρωτοτοπλάστη (λόγω του υπερβολικού νερού που εισέρχεται) ή της συρρίκνωσης (λόγω του υπερβολικού νερού που εξέρχεται).
Πώς λειτουργούν τα ένζυμα
1. Το Macerozyme αποδυναμώνει το κυτταρικό τοίχωμα στοχεύοντας το μεσαίο έλασμα.
2. Η κυτταρίνη Onozuka υποβαθμίζει περαιτέρω το κυτταρικό τοίχωμα σπάζοντας την κυτταρίνη
3. Η σορβιτόλη και η μαννιτόλη διατηρούν την εσωτερική ωσμωτική πίεση του πρωτοπλάστες, αποτρέποντας τη βλάβη κατά τη διάρκεια της διαδικασίας.
Βασικά σημεία:
* Τα συγκεκριμένα ένζυμα που χρησιμοποιούνται στην απομόνωση των πρωτοπλάστες ποικίλλουν ανάλογα με τα φυτικά είδη και τον στόχο της έρευνας.
* Άλλα ένζυμα, όπως οι πηκτινάσες (για να διασπαστούν η πηκτίνη) και οι ημικυτταρίες, χρησιμοποιούνται επίσης μερικές φορές.
* Η βελτιστοποίηση της συγκέντρωσης ενζύμου, του χρόνου επώασης και του ρΗ είναι ζωτικής σημασίας για την επιτυχή απομόνωση των πρωτοπλάστες.
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν έχετε περισσότερες ερωτήσεις σχετικά με την απομόνωση των πρωτοπλάστες ή τον ρόλο συγκεκριμένων ενζύμων!
