Γιατί η αμμωνία προκαλεί αλλαγή χρώματος στην αντίδραση Biuret;
Δείτε πώς λειτουργεί:
1. Τα ιόντα χαλκού (Cu2⁺) αντιδρούν με πεπτιδικούς δεσμούς: Παρουσία ιόντων χαλκού, οι πεπτιδικοί δεσμοί σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα με τα ιόντα χαλκού. Αυτό το σύμπλεγμα είναι άχρωμο .
2. Η αμμωνία λειτουργεί ως καταλύτης: Η αμμωνία προστίθεται στο μίγμα της αντίδρασης για να αυξήσει το ρΗ και να κάνει τη διάλυμα πιο αλκαλική. Αυτό βοηθά στη σταθεροποίηση του συμπλέγματος που σχηματίζεται μεταξύ των ιόντων χαλκού και των πεπτιδίων δεσμών.
3. Σχηματισμός ενός χρωματισμένου συμπλέγματος: Το σύμπλοκο που σχηματίζεται στο βήμα 1 αντιδρά με αμμωνία για να σχηματίσει ένα βιολετί χρώματος σύμπλοκο . Η ένταση του χρώματος είναι άμεσα ανάλογη με τη συγκέντρωση των πεπτιδικών δεσμών που υπάρχουν.
Επομένως, η αμμωνία δεν προκαλεί άμεσα την αλλαγή χρώματος, αλλά είναι ένα κρίσιμο συστατικό που βοηθά στο σχηματισμό του χρωματισμένου συμπλόκου από:
* Αύξηση του pH: Αυτό επιτρέπει τον σχηματισμό του αρχικού συμπλέγματος δεσμού χαλκού-πεπτιδίου.
* σταθεροποίηση του συμπλόκου: Το αλκαλικό περιβάλλον που δημιουργείται από την αμμωνία βοηθά στη σταθεροποίηση του συμπλέγματος, οδηγώντας στο σχηματισμό του χρωματισμένου συμπλέγματος.
Έτσι, η αλλαγή χρώματος στην αντίδραση Biuret είναι αποτέλεσμα της αλληλεπίδρασης μεταξύ των ιόντων χαλκού, των πεπτιδίων δεσμών και της αμμωνίας