Πώς προετοιμάζετε τη λύση 10mm του Tris-HCl;
Κατανόηση των βασικών
* tris-hcl: Πρόκειται για ένα ρυθμιστικό διάλυμα που κατασκευάζεται συνδυάζοντας το αμινομεθάνιο Tris (Tris (υδροξυμεθυλ) με υδροχλωρικό οξύ (HCl).
* 10 mm: Αυτό σημαίνει 10 χιλιοστά, υποδεικνύοντας τη συγκέντρωση του διαλύματος. Σημαίνει ότι υπάρχουν 10 χιλιοστά Tris-HCl ανά λίτρο διαλύματος.
Υλικά
* Βάση Tris (δωρεάν βάση): Θα χρειαστείτε μια συγκεκριμένη ποσότητα σκόνης βάσης Tris.
* Υδροχλωρικό οξύ (HCl): Θα χρειαστείτε ένα συμπυκνωμένο διάλυμα HCl (συνήθως 1m ή 12m).
* Απιωμένο νερό: Χρησιμοποιήστε απιονισμένο νερό υψηλής ποιότητας για ακρίβεια.
* Βαθμολογημένος κύλινδρος: Για τη μέτρηση των όγκων με ακρίβεια.
* κλίμακα ζύγισης: Για να ζυγίζει με ακρίβεια τη σκόνη βάσης Tris.
* μετρητής pH (προαιρετικό): Για ακριβή ρύθμιση του ρΗ.
Υπολογισμοί
1. Μοριακό βάρος της βάσης Tris: Το μοριακό βάρος της βάσης Tris είναι 121,14 g/mol.
2. Υπολογίστε τη μάζα της βάσης Tris που απαιτείται: Θα χρησιμοποιήσετε τον ακόλουθο τύπο για να υπολογίσετε τη μάζα της βάσης Tris:
* Μάζα (g) =(συγκέντρωση (mm) × μοριακό βάρος (g / mol) × όγκος (L)) / 1000
* Για διάλυμα 10 mm σε 1 λίτρο (1000 mL):
* Μάζα =(10 mm × 121,14 g / mol × 1 l) / 1000
* Μάζα =1,2114 g
Διαδικασία
1. Ζυγίστε τη βάση Tris: Ζυγίστε προσεκτικά την υπολογιζόμενη ποσότητα βάσης Tris (1,2114 g για 1 λίτρο).
2. Διαλύστε τη βάση Tris στο νερό: Προσθέστε τη βάση Tris σε περίπου 800 ml απιονισμένου νερού σε κατάλληλο δοχείο. Ανακατέψτε μέχρι να διαλυθεί πλήρως η σκόνη.
3. Ρυθμίστε το pH:
* Χρησιμοποιώντας ένα μετρητή pH: Προσθέστε συμπυκνωμένο HCl στάγδην στο διάλυμα TRIS ενώ παράλληλα παρακολουθείτε το ρΗ με μετρητή pH. Ρυθμίστε το pH στην επιθυμητή τιμή (συνήθως περίπου 7,5 έως 8,5 για buffer Tris-HCL).
* Χωρίς μετρητή pH: Προσθέστε περίπου 0,5 ml συμπυκνωμένου HCl (για διάλυμα 1 L). Ανακατέψτε το διάλυμα και ελέγξτε το pH χρησιμοποιώντας το χαρτί pH. Ρυθμίστε ανάλογα τον όγκο HCl μέχρι να επιτευχθεί το επιθυμητό ρΗ.
4. Φέρτε τη λύση στον τελικό τόμο: Μετά τη ρύθμιση του ρΗ, προσθέστε απιονισμένο νερό για να φέρετε το συνολικό όγκο του διαλύματος σε 1 λίτρο.
5. Αποστείρωση: Αποστειρώστε το διάλυμα εάν είναι απαραίτητο με αυτόκλειστο.
Σημαντικές σημειώσεις
* Ρύθμιση ρΗ: Η ακριβής ποσότητα HCl που απαιτείται για την επίτευξη του επιθυμητού ρΗ θα ποικίλει ελαφρώς ανάλογα με την καθαρότητα της βάσης Tris και τη συγκέντρωση του διαλύματος HCl.
* Ακρίβεια: Χρησιμοποιήστε ακριβείς κλίμακες ζύγισης και αποφοίτους κυλίνδρους για να εξασφαλίσετε ακριβή προετοιμασία.
* Αποθήκευση: Αποθηκεύστε το διάλυμα Tris-HCl σε θερμοκρασία δωματίου ή στο ψυγείο.
* Life Life: Οι λύσεις TRIS-HCL έχουν γενικά καλή διάρκεια ζωής, αλλά είναι πάντα καλύτερο να ελέγχετε για τυχόν ενδείξεις υποβάθμισης (π.χ. αποχρωματισμός, θολότητα).
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις ή θέλετε να προετοιμάσετε διαφορετική συγκέντρωση ή όγκο διαλύματος Tris-HCl. Χαίρομαι που βοηθώ!
