Ποια είναι η λειτουργία του διαλύματος θειικού χαλκού στη δοκιμή Biuret;
Δείτε πώς λειτουργεί:
1. Αντίδραση με πεπτιδικούς δεσμούς: Παρουσία ενός αλκαλικού διαλύματος (όπως το υδροξείδιο του νατρίου), τα ιόντα χαλκού (Cu2⁺) από θειικό χαλκό αντιδρούν με πεπτιδικούς δεσμούς σε πρωτεΐνες. Αυτή η αντίδραση σχηματίζει ένα σύμπλεγμα συντονισμού μεταξύ των ιόντων χαλκού και των ατόμων αζώτου εντός των πεπτιδίων δεσμών.
2. Αλλαγή χρώματος: Ο σχηματισμός αυτού του συμπλέγματος έχει ως αποτέλεσμα ένα ξεχωριστό χρώμα ιώδους αλλαγή στη λύση. Η ένταση του ιώδους χρώματος είναι άμεσα ανάλογη με τη συγκέντρωση των πεπτιδίων δεσμών (και επομένως, της πρωτεΐνης) στο δείγμα.
Συνοπτικά, θειικό χαλκό:
* Διευκολύνει την αντίδραση μεταξύ πεπτιδικών δεσμών και ιόντων χαλκού.
* Δημιουργεί ένα έγχρωμο σύμπλεγμα που επιτρέπει την ποιοτική και ποσοτική ανίχνευση πρωτεϊνών.
Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι η δοκιμή Biuret ανιχνεύει την παρουσία ομολόγων πεπτιδίων , που βρίσκονται σε όλες τις πρωτεΐνες. Επομένως, ένα θετικό αποτέλεσμα υποδεικνύει την παρουσία πρωτεϊνών, αλλά δεν αναγνωρίζει τον συγκεκριμένο τύπο πρωτεΐνης.