Εάν φτιάξετε μια λύση 100 mL 0,1 Μ HEPES στη βασική μορφή, τι θα είναι pH;
* Το HEPES είναι ένα buffer: Το HEPES (4- (2-υδροξυαιθυλ) -1-piperazineethanesulfonic οξύ) είναι ένα κοινό βιολογικό ρυθμιστικό διάλυμα. Τα buffers αντιστέκονται στις αλλαγές στο pH.
* Βασική μορφή: Η βασική μορφή των HEPES σημαίνει ότι έχετε προσθέσει αρκετή βάση (όπως το NaOH) για να αποπροστονήσει την όξινη ομάδα στο μόριο HEPES.
* Άγνωστο pka: Για να υπολογίσετε το pH, πρέπει να γνωρίζετε το PKA του HEPES. Αυτή η τιμή σας λέει σε ποιο pH το buffer είναι πιο αποτελεσματικό στην αντίσταση στις αλλαγές.
* Henderson-Hasselbalch Εξίσωση: Το ρΗ ενός ρυθμιστικού διαλύματος μπορεί να υπολογιστεί χρησιμοποιώντας την εξίσωση Henderson-Hasselbalch:
ph =pka + log ([base]/[acid])
* [Βάση]: Η συγκέντρωση της αποπρωτονισμένης (βασικής) μορφής των HEPES
* [οξύ]: Η συγκέντρωση της πρωτονιωμένης (όξινης) μορφής των HEPES
Για να προσδιορίσετε το pH, πρέπει να γνωρίζετε:
1. Το pka των hepes: Αυτό παρέχεται συνήθως στο πλαίσιο του προβλήματος ή μπορεί να εξεταστεί σε μια αναφορά.
2. Η αναλογία [βάσης]/[acid]: Γνωρίζετε τη συνολική συγκέντρωση του HEPES (0,1 m), αλλά δεν ξέρετε πόσο είναι στη βασική μορφή και πόσο είναι στην όξινη μορφή. Αυτό εξαρτάται από το πόση βάση προσθέσατε για να αποπρωνείστε τους Hepes.
Παράδειγμα:
Ας πούμε ότι το PKA του HEPES είναι 7,55. Εάν προσθέσατε αρκετή βάση για να αποπρωνεύσετε πλήρως τους HEPES (που σημαίνει [βάση] =0,1 m και [acid] =0 m), το pH θα ήταν:
ph =7,55 + log (0,1/0) =7,55 + άπειρο
Δεδομένου ότι το ημερολόγιο του 0 είναι αρνητικό άπειρο, το pH θα ήταν πολύ υψηλό (βασικό). Ωστόσο, σε πραγματικές καταστάσεις, θα έχετε πιθανώς ένα μείγμα τόσο των βασικών όσο και των όξινων μορφών των HEPE.
