Ποιες τεχνικές διαχωρίζουν τα μόρια με βάση το μέγεθος;
Χρωματογραφικές τεχνικές:
* Χρωματογραφία διαπερατότητας μεγέθους-αποκλεισμού (SEC) / GEL (GPC): Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί μια στατική φάση με πόρους συγκεκριμένων μεγεθών. Τα μεγαλύτερα μόρια δεν μπορούν να εισέλθουν πρώτα στους πόρους και να εξεύξουν πρώτα, ενώ τα μικρότερα μόρια μπορούν να εισέλθουν στους πόρους και να εκδιώξουν αργότερα.
* χρωματογραφία διήθησης πηκτής: Παρόμοια με το SEC/GPC, αλλά συνήθως χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό των βιομορίων.
* κλασμάτωση ροής πεδίου (FFF): Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ένα πεδίο (π.χ. φυγοκεντρική, ηλεκτρική ή θερμική) για να διαχωρίσει τα μόρια με βάση το μέγεθος και την πυκνότητα τους.
ηλεκτροφορητικές τεχνικές:
* Ηλεκτροφόρηση τριχοειδούς (CE): Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ένα ηλεκτρικό πεδίο για να διαχωρίσει τα μόρια με βάση το μέγεθος και τη φόρτιση.
* ηλεκτροφόρηση πηκτής: Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί μια μήτρα πηκτής για να διαχωρίσει τα μόρια με βάση το μέγεθός τους.
Άλλες τεχνικές:
* Ultrafiltration: Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί μια μεμβράνη με πόρους συγκεκριμένων μεγεθών για να διαχωρίσει τα μόρια. Τα μεγαλύτερα μόρια διατηρούνται, ενώ τα μικρότερα μόρια διέρχονται.
* φυγοκέντρηση: Αν και δεν βασίζεται αυστηρά μόνο στο μέγεθος, η φυγοκέντρηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να διαχωριστούν τα μόρια με βάση τον συντελεστή καθίζησης τους, ο οποίος επηρεάζεται από το μέγεθος, το σχήμα και την πυκνότητα.
Η επιλογή της τεχνικής εξαρτάται από τη συγκεκριμένη εφαρμογή και τις ιδιότητες των μορίων που πρόκειται να διαχωριστούν. Για παράδειγμα, το SEC/GPC είναι κατάλληλο για τον διαχωρισμό μεγάλων μορίων όπως πρωτεΐνες και πολυμερή, ενώ το CE είναι καλύτερο για τον διαχωρισμό μικρότερων μορίων όπως τα πεπτίδια και τα ολιγονουκλεοτίδια.
Εδώ είναι ένας πίνακας που συνοψίζει τις τεχνικές:
| Τεχνική | Αρχή | Εύρος μεγέθους | Εφαρμογή |
| --- | --- | --- | --- |
| Χρωματογραφία αποκλεισμού μεγέθους (SEC) | Διαχωρισμός με βάση το μοριακό μέγεθος μέσω της πορώδους στατικής φάσης | Μακρομόρια, πολυμερή | Καθαρισμός πρωτεΐνης, ανάλυση πολυμερούς |
| Ηλεκτροφόρηση πηκτής | Διαχωρισμός με βάση το μοριακό μέγεθος μέσω της μήτρας πηκτής | Πρωτεΐνες, DNA | Γενετική ανάλυση, χαρακτηρισμός πρωτεϊνών |
| Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση (CE) | Διαχωρισμός με βάση το μέγεθος και τη φόρτιση χρησιμοποιώντας ηλεκτρικό πεδίο | Μικρά μόρια, πεπτίδια, ολιγονουκλεοτίδια | Ανάλυση φαρμάκων, ανίχνευση βιοδεικτών |
| Εξαιρετική διάδοση | Διαχωρισμός με βάση το μοριακό μέγεθος μέσω των πόρων της μεμβράνης | Μακρομόρια, κολλοειδή | Καθαρισμός νερού, συγκέντρωση πρωτεΐνης |
| Φυγοκέντρηση | Διαχωρισμός με βάση τον συντελεστή καθίζησης | Μακρομόρια, κύτταρα, οργανίδια | Κλασματοποίηση κυττάρων, καθίζηση πρωτεΐνης |
