Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης

Η κύρια διαφορά μεταξύ κλωνοποίησης και υποκλωνοποίησης είναι ότι κλωνοποίηση είναι η παραγωγή κλώνων οργανισμών ή αντιγράφων κυττάρων ή θραυσμάτων DNA, ενώ η υποκλωνοποίηση είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για τη μετακίνηση μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας DNA από έναν γονικό φορέα σε έναν φορέα προορισμού . Επιπλέον, η κλωνοποίηση χρησιμοποιεί πρωτεύον cDNA ή γονίδιο, ενώ η υποκλωνοποίηση περιλαμβάνει τον επακόλουθο χειρισμό του κλώνου αλλάζοντας τον φορέα ή το πρωτεύον ένθετο.

Η κλωνοποίηση και η υποκλωνοποίηση είναι δύο τεχνικές στη μοριακή βιολογία για τον χειρισμό των γονιδιωμάτων των οργανισμών με την εισαγωγή θραυσμάτων DNA που μας ενδιαφέρουν.

Βασικές περιοχές που καλύπτονται

1. Τι είναι η Κλωνοποίηση
     – Ορισμός, Μέθοδος, Σημασία
2. Τι είναι η Υποκλωνοποίηση
     – Ορισμός, Μέθοδος, Σημασία
3. Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησηςς
     – Περίληψη κοινών χαρακτηριστικών
4. Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησηςς
     – Σύγκριση βασικών διαφορών

Βασικοί όροι

Κλωνοποίηση, Διάνυσμα έκφρασης, Εισαγωγή, Γονικό διάνυσμα, Υποκλωνοποίηση

Τι είναι η κλωνοποίηση

Η κλωνοποίηση είναι μια τεχνική στη μοριακή βιολογία που βοηθά στη δημιουργία πολλαπλών μορίων ενός θραύσματος DNA που μας ενδιαφέρει. Ως εκ τούτου, είναι επίσης γνωστή ως μοριακή κλωνοποίηση. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ενίσχυση τόσο του κωδικοποιητικού όσο και του μη κωδικοποιητικού DNA όπως γονίδια και ρυθμιστικές αλληλουχίες DNA συμπεριλαμβανομένων των προαγωγέων, αντίστοιχα. Επιπλέον, έχει μεγάλη ποικιλία εφαρμογών από γενετικό δακτυλικό αποτύπωμα έως παραγωγή πρωτεΐνης σε μεγάλη κλίμακα.

Εικόνα 1:Μοριακή κλωνοποίηση

Επιπλέον, τα βήματα στην κλωνοποίηση είναι τα εξής:

1. Κατακερματισμός – διάσπαση ενός κλώνου DNA με περιοριστική πέψη
2. Σύνδεση – συγκόλληση κομματιών DNA στην επιθυμητή αλληλουχία
3. Μεταμόλυνση – εισαγωγή των νεοσχηματισθέντων κομματιών DNA στα κύτταρα
4. Έλεγχος/επιλογή – επιλογή των κυττάρων που διαμολύνθηκαν επιτυχώς με το νέο DNA

Ωστόσο, η κλωνοποίηση αναφέρεται επίσης στην παραγωγή ενός μεγάλου αριθμού γενετικά πανομοιότυπων ατόμων από έναν γονικό οργανισμό. Μπορεί να εμφανιστεί φυσικά στο περιβάλλον με τη μορφή αναπαραγωγής. Από την άλλη πλευρά, μπορεί να πραγματοποιηθεί εντός εργαστηρίου όπως γίνεται στις τεχνικές καλλιέργειας ιστών.

Τι είναι η Υποκλωνοποίηση

Η υποκλωνοποίηση είναι μια τεχνική στη μοριακή βιολογία που βοηθά στη μετακίνηση του ενθέτου DNA από το μητρικό πλασμίδιο σε έναν δεύτερο φορέα. Εδώ, ο δεύτερος φορέας μπορεί να είναι ένας φορέας έκφρασης, ο οποίος επιτρέπει την έκφραση του θραύσματος DNA. Επιπλέον, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αλλαγή της έκφρασης κάτω από διαφορετικό προαγωγέα. Διαφορετικά, ο δεύτερος φορέας μπορεί να περιέχει ειδικά χαρακτηριστικά, όπως ειδικό δείκτη για επιλογή αντιβιοτικών ή έκφραση φθορισμού.

Εικόνα 2:Υποκλωνοποίηση

Επιπλέον, τα βήματα στην υποκλωνοποίηση είναι τα εξής:

1. Πρώτα, απελευθερώστε και καθαρίστε το ένθετο από τον γονικό φορέα με περιοριστική πέψη
2. Συνδέστε το ένθετο σε ένα προετοιμασμένο διάνυσμα προορισμού
3. Στη συνέχεια, μετατρέψτε την αντίδραση απολίνωσης σε ικανά βακτηριακά κύτταρα
4. Ελέγξτε τα μετασχηματισμένα κελιά για το ένθετο

Ομοιότητες μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης

• Η κλωνοποίηση και η υποκλωνοποίηση είναι δύο τεχνικές της μοριακής βιολογίας για τον χειρισμό γονιδιωμάτων.
• Και τα δύο είναι σημαντικά για την εισαγωγή ενός ενδιαφέροντος τμήματος DNA στο γονιδίωμα ενός οργανισμού.
• Επιπλέον, είναι σημαντικά και στην κατασκευή βιβλιοθηκών γονιδιώματος.
• Επίσης, και οι δύο μέθοδοι βασίζονται στην περιοριστική πέψη και στην PCR.

Διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης

Ορισμός

Η κλωνοποίηση αναφέρεται στη διαδικασία δημιουργίας κλώνων οργανισμών ή αντιγράφων κυττάρων ή θραυσμάτων DNA, ενώ η υποκλωνοποίηση αναφέρεται σε μια τεχνική που χρησιμοποιείται για τη μετακίνηση μιας συγκεκριμένης αλληλουχίας DNA από έναν γονικό φορέα σε έναν προορισμό διάνυσμα. Έτσι, αυτή είναι η κύρια διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης.

Σημασία

Επιπλέον, η κλωνοποίηση μπορεί να εισάγει ένα ενδιαφέρον DNA στο γονιδίωμα ενός συγκεκριμένου οργανισμού, ενώ η υποκλωνοποίηση μπορεί να εισάγει το τμήμα DNA που μας ενδιαφέρει σε έναν δεύτερο φορέα.

Τύπος διανυσμάτων

Ο τύπος των διανυσμάτων είναι μια άλλη διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης. Η κλωνοποίηση χρησιμοποιεί συχνά φορείς κλωνοποίησης ενώ η υποκλωνοποίηση μπορεί να χρησιμοποιεί φορείς έκφρασης.

Συμπέρασμα

Η κλωνοποίηση είναι μια τεχνική στη μοριακή βιολογία που βοηθά στην εισαγωγή ενός ενδιαφέροντος θραύσματος DNA σε έναν οργανισμό ξενιστή ή στην κατασκευή βιβλιοθηκών DNA, ενώ η υποκλωνοποίηση είναι μια άλλη τεχνική στη μοριακή βιολογία που βοηθά στην εισαγωγή ένα θραύσμα DNA από έναν γονικό φορέα σε έναν άλλο φορέα επίσης. Επομένως, αυτή είναι η κύρια διαφορά μεταξύ της κλωνοποίησης και της υποκλωνοποίησης.