Ποια είναι η ανάγκη για φυγόκεντρο στην απομόνωση DNA;

Η φυγοκέντρηση διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στην απομόνωση του DNA με διαχωρίζοντας διαφορετικά συστατικά ενός δείγματος με βάση την πυκνότητα τους . Δείτε πώς χρησιμοποιείται σε διάφορα στάδια:

1. Κυτταρική λύση:

* Breaking Open Cells: Η φυγοκέντρηση χρησιμοποιείται για να σπάσει τα ανοικτά κύτταρα (όπως τα αιμοσφαίρια, τα βακτήρια ή τα φυτικά κύτταρα) για την απελευθέρωση του DNA. Αυτό μπορεί να γίνει μέσω φυσικών μεθόδων όπως στροβιλισμού ή υπερήχου, αλλά η φυγοκέντρηση βοηθά στον διαχωρισμό των κυττάρων από το απελευθερωμένο DNA.

* Αφαίρεση κυτταρικών συντριμμιών: Μετά τη λύση, το δείγμα φυγοκεντρείται με σχετικά χαμηλή ταχύτητα. Τα βαρύτερα συντρίμμια κυττάρων, οργανίδια και πρωτεΐνες εγκαθίστανται στον πυθμένα, σχηματίζοντας ένα σφαιρίδιο, ενώ το DNA παραμένει στο υπερκείμενο (το υγρό πάνω από το σφαιρίδιο).

2. Κατοίκους DNA:

* Διαχωρισμός DNA από διάλυμα: Αφού το DNA κατακρημνίζεται από το διάλυμα (συνήθως χρησιμοποιώντας αιθανόλη ή ισοπροπανόλη), η φυγοκέντρηση με υψηλότερη ταχύτητα χρησιμοποιείται για να σφαιρωθεί το DNA. Το σφαιρίδιο στη συνέχεια πλένεται με διάλυμα όπως η αιθανόλη για να απομακρυνθεί τυχόν μολυσματικές ουσίες.

* Συγκέντρωση: Η φυγοκέντρηση μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για να συγκεντρωθεί το DNA με την περιστροφή ενός μεγάλου όγκου διαλύματος σε μικρότερο όγκο. Αυτό είναι χρήσιμο όταν εργάζεστε με μικρές ποσότητες DNA.

3. Καθαρισμός:

* Αφαίρεση μολυσματικών ουσιών: Η φυγοκέντρηση χρησιμοποιείται για την απομάκρυνση των ρύπων όπως οι πρωτεΐνες, τα λιπίδια και το RNA, οι οποίες συχνά υπάρχουν παράλληλα με το DNA. Διαφορετικά πρωτόκολλα φυγοκέντρησης με συγκεκριμένες ταχύτητες και ρυθμιστικά χρησιμοποιούνται για να διαχωριστούν επιλεκτικά αυτές οι μολυσματικές ουσίες.

Συνοπτικά:

* Διαταραχή των κυττάρων και απομάκρυνση των συντριμμιών: Η φυγοκέντρηση διαχωρίζει τα κυτταρικά υπολείμματα από το απελευθερωμένο DNA.

* Κατοικίες και συγκέντρωση DNA: Η φυγοκέντρηση σφαιρείται με το DNA και βοηθά στη συγκέντρωση του.

* Καθαρισμός: Η φυγοκέντρηση διαχωρίζει μολυσματικές ουσίες από το DNA, οδηγώντας σε καθαρότερο και πιο συμπυκνωμένο δείγμα DNA.

Χρησιμοποιώντας ένα συνδυασμό αυτών των τεχνικών, η φυγοκέντρηση διαδραματίζει ζωτικό ρόλο στην εξασφάλιση της επιτυχούς απομόνωσης και καθαρισμού του DNA.