Τι είναι ο προσαρμογέας στην τεχνολογία ανασυνδυασμένου DNA;
Εδώ είναι μια κατανομή:
Τι είναι;
* Οι προσαρμογείς είναι μικρές, ειδικά σχεδιασμένες αλληλουχίες DNA με κολλώδη άκρα , τα οποία είναι σύντομες, μονοκλωνικές προεξοχές που μπορούν να δεσμεύονται με συμπληρωματικές ακολουθίες.
* Είναι συνήθως 10-20 ζεύγη βάσεων μήκους.
Ποιος είναι ο σκοπός τους;
1. Συμμετοχή θραυσμάτων DNA με ασυμβίβαστα άκρα:
* Μερικές φορές, τα θραύσματα DNA που θέλετε να ενώσετε έχουν διαφορετικές θέσεις κοπής ενζύμου περιορισμού, με αποτέλεσμα ασυμβίβαστα άκρα.
* Οι προσαρμογείς μπορούν να συνδεθούν στα άκρα αυτών των θραυσμάτων, παρέχοντας συμβατά κολλώδη άκρα που στη συνέχεια μπορούν να ενωθούν με λιγάση DNA.
2. Δημιουργία συγκεκριμένων θέσεων ενζύμου περιορισμού:
* Μπορεί να χρειαστείτε μια συγκεκριμένη τοποθεσία ενζύμου περιορισμού για κλωνοποίηση ή άλλους χειρισμούς.
* Οι προσαρμογείς μπορούν να σχεδιαστούν για να συμπεριλάβουν αυτές τις τοποθεσίες, επιτρέποντάς σας να δημιουργήσετε τον επιθυμητό σημείο περιορισμού στο θραύσμα DNA.
3. Προσθήκη νέων ακολουθιών:
* Οι προσαρμογείς μπορούν να μεταφέρουν συγκεκριμένες αλληλουχίες όπως υποψήφιους, κωδικόνια έναρξης ή άλλα ρυθμιστικά στοιχεία.
* Αυτά μπορούν να προστεθούν στο θραύσμα DNA με σύνδεση του προσαρμογέα.
Πώς λειτουργεί:
1. Το θραύσμα του DNA που ενδιαφέρει χωνεύεται με ένα ένζυμο περιορισμού για να δημιουργήσει κολλώδη άκρα.
2. Αποσύνδεση προσαρμογέα: Ο προσαρμογέας συνδέεται με τα άκρα του θραύσματος DNA, χρησιμοποιώντας λιγάση ϋΝΑ.
3. Συμμετοχή με άλλα θραύσματα: Το θραύσμα τροποποιημένο προσαρμογέα μπορεί στη συνέχεια να ενωθεί με άλλα θραύσματα, είτε με πρόσδεση είτε με άλλες μεθόδους, για να δημιουργηθεί ένα μεγαλύτερο μόριο DNA.
Παράδειγμα:
* Φανταστείτε ότι θέλετε να εισαγάγετε ένα γονίδιο σε ένα πλασμίδιο.
* Το γονίδιο έχει κοπεί με ένζυμο Α, δημιουργώντας κολλώδη άκρα.
* Το πλασμίδιο έχει κοπεί με ένζυμο Β, δημιουργώντας διαφορετικά κολλώδη άκρα.
* Μπορείτε να χρησιμοποιήσετε έναν προσαρμογέα με κολλώδη άκρα συμβατά με τα ενζυμικά Α και το ένζυμο Β για να ενταχθούν στο γονίδιο και στο πλασμίδιο.
Συνοπτικά:
Οι προσαρμογείς είναι ευπροσάρμοστα εργαλεία στην τεχνολογία ανασυνδυασμένου DNA που διευκολύνουν τη σύνδεση θραυσμάτων DNA, τη δημιουργία συγκεκριμένων θέσεων ενζύμου περιορισμού και την προσθήκη νέων αλληλουχιών σε μόρια DNA. Διαδραματίζουν κρίσιμο ρόλο στο χειρισμό του DNA για διάφορες εφαρμογές, συμπεριλαμβανομένης της κλωνοποίησης γονιδίων, της γονιδιακής θεραπείας και της διαγνωστικής.
