Τι είναι μια ελεύθερη ή μετακινούμενη ηλεκτροφόρηση ορίων;

Ελεύθερη ή κινούμενη οριακή ηλεκτροφόρηση

Η ελεύθερη ή μετακινούμενη οριακή ηλεκτροφόρηση είναι ένας τύπος τεχνικής ηλεκτροφόρησης που βασίζεται στην κίνηση ενός αιχμηρού ορίου Μεταξύ μιας λύσης που περιέχει την αναλυτική ουσία (η ουσία ενδιαφέροντος) και ένα διάλυμα buffer . Αυτή η τεχνική αναπτύχθηκε από τον Arne Tiselius Στη δεκαετία του 1930 και του κέρδισε το Βραβείο Νόμπελ στη Χημεία το 1948 .

Εδώ λειτουργεί:

1. Προετοιμασία: Ένα διάλυμα που περιέχει τον αναλύτη είναι στρωματοποιημένο πάνω από ένα ρυθμιστικό διάλυμα σε κάθετο γυάλινο σωλήνα. Οι δύο λύσεις έχουν διαφορετικούς διαθλαστικούς δείκτες, δημιουργώντας ένα ορατό όριο.

2. Ηλεκτροφόρηση: Εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό πεδίο σε όλο τον σωλήνα. Τα φορτισμένα μόρια αναλύτη μεταναστεύουν προς το ηλεκτρόδιο με το αντίθετο φορτίο.

3. Μετανάστευση: Τα μόρια της αναλύτη κινούνται μέσω του ρυθμιστικού διαλύματος, δημιουργώντας ένα κινούμενο όριο που μπορεί να παρατηρηθεί χρησιμοποιώντας Schlieren Optics . Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί τη διάθλαση φωτός για να απεικονίσει το όριο και να μετρήσει την κίνηση της.

4. Ανάλυση: Το ποσοστό μετανάστευσης του ορίου είναι ανάλογο με την ηλεκτροφορητική κινητικότητα του αναλύτη , η οποία καθορίζεται από το φορτίο και το μέγεθος του. Αυτές οι πληροφορίες μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον εντοπισμό και τον ποσοτικό προσδιορισμό διαφορετικών εξαρτημάτων στο μίγμα αναλύτη.

Βασικά χαρακτηριστικά της ελεύθερης ή κινούμενης οριακής ηλεκτροφόρησης:

* Δεν υπάρχει μέσο στήριξης: Ο αναλύτης μεταναστεύει μέσω ενός υγρού ρυθμιστικού διαλύματος, σε αντίθεση με άλλες τεχνικές ηλεκτροφόρησης που χρησιμοποιούν πηκτές ή μεμβράνες.

* αιχμηρά όρια: Η παρουσία ενός ξεχωριστού ορίου επιτρέπει την ακριβή μέτρηση της μετανάστευσης του αναλύτη.

* Ποσοτική ανάλυση: Η τεχνική είναι κατάλληλη για ποσοτική ανάλυση διαφορετικών συστατικών σε ένα μείγμα.

* Περιορισμένη ανάλυση: Σε σύγκριση με άλλες τεχνικές ηλεκτροφόρησης, η κινούμενη ηλεκτροφόρηση ορίων έχει περιορισμένη ανάλυση για τον διαχωρισμό σύνθετων μιγμάτων.

Εφαρμογές:

* Χαρακτηρισμός πρωτεΐνης: Προσδιορισμός της καθαρότητας και της ομοιογένειας των πρωτεϊνικών διαλυμάτων.

* Ισοηλεκτρική εστίαση: Προσδιορισμός του ισοηλεκτρικού σημείου πρωτεϊνών.

* Ανάλυση πρωτεΐνης ορού: Μελετώντας τη σύνθεση πρωτεϊνών ορού σε κλινικές εφαρμογές.

Περιορισμοί:

* Περιορισμένη ανάλυση: Σε σύγκριση με άλλες τεχνικές, έχει χαμηλότερη ισχύ επίλυσης για σύνθετα μίγματα.

* Τεχνικές προκλήσεις: Απαιτεί εξειδικευμένο εξοπλισμό και ακριβείς πειραματικές συνθήκες.

* χρονοβόρα: Η διαδικασία μπορεί να είναι σχετικά χρονοβόρα.

Σύγχρονες τεχνικές:

Ενώ η ελεύθερη ή κινούμενη οριακή ηλεκτροφόρηση ήταν μια σημαντική ανακάλυψη στην εποχή της, έχει αντικατασταθεί σε μεγάλο βαθμό από πιο εξελιγμένες και ευπροσάρμοστες τεχνικές ηλεκτροφόρησης, όπως η ηλεκτροφόρηση GEL και τριχοειδή ηλεκτροφόρηση . Αυτές οι τεχνικές προσφέρουν υψηλότερη ανάλυση, απλούστερη λειτουργία και ευρύτερη δυνατότητα εφαρμογής.

Ωστόσο, η ιστορική σημασία της ελεύθερης ή κινούμενης οριακής ηλεκτροφόρησης παραμένει καθώς άνοιξε το δρόμο για την ανάπτυξη σύγχρονων τεχνικών ηλεκτροφόρησης που χρησιμοποιούνται ευρέως σε διάφορους τομείς σήμερα.