Ποιος είναι ο κύριος εργαζόμενος της ηλεκτροφόρησης;

Αρχή λειτουργίας της ηλεκτροφόρησης:

Η ηλεκτροφόρηση είναι μια τεχνική που διαχωρίζει τα μόρια με βάση το φορτίο και μέγεθος . Χρησιμοποιεί ένα ηλεκτρικό πεδίο Για να μετακινήσετε φορτισμένα μόρια μέσω ενός πηκτώματος ή άλλης μήτρας .

Ακολουθεί μια ανάλυση της αρχής λειτουργίας:

1. Προετοιμασία δείγματος: Το δείγμα που περιέχει τα μόρια που πρόκειται να διαχωριστεί παρασκευάζεται σε κατάλληλο διάλυμα ρυθμιστικού διαλύματος.

2. πηκτώματα ή μήτρα: Το δείγμα φορτώνεται σε πήκτωμα ή άλλη μήτρα, όπως μια πορώδη μεμβράνη ή χαρτί. Το πήκτωμα λειτουργεί ως κόσκινο, επιτρέποντας στα μικρότερα μόρια να μεταναστεύσουν ταχύτερα από τα μεγαλύτερα. Τα κοινά πηκτώματα περιλαμβάνουν αγαρόζη για μεγαλύτερα μόρια όπως το DNA και το πολυακρυλαμίδιο για μικρότερα μόρια όπως οι πρωτεΐνες.

3. Εφαρμογή ηλεκτρικού πεδίου: Εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό πεδίο σε όλη τη γέλη, με το ένα άκρο να είναι θετικά φορτισμένο (άνοδο) και το άλλο άκρο να είναι αρνητικά φορτισμένο (κάθοδος).

4. Μετανάστευση: Τα φορτισμένα μόρια εντός του δείγματος θα μεταναστεύσουν προς το ηλεκτρόδιο με το αντίθετο φορτίο. Για παράδειγμα, τα αρνητικά φορτισμένα μόρια θα κινούνται προς την άνοδο (θετικό ηλεκτρόδιο), ενώ τα θετικά φορτισμένα μόρια θα κινούνται προς την κάθοδο (αρνητικό ηλεκτρόδιο).

5. Διαχωρισμός: Ο ρυθμός μετανάστευσης εξαρτάται από το φορτίο, το μέγεθος και τη δύναμη του ηλεκτρικού πεδίου του μορίου.

* χρέωση: Τα πολύ φορτισμένα μόρια μεταναστεύουν ταχύτερα από τα λιγότερο φορτισμένα μόρια.

* Μέγεθος: Τα μικρότερα μόρια κινούνται μέσω της μήτρας πηκτής πιο εύκολα από τα μεγαλύτερα μόρια.

* Αντοχή ηλεκτρικού πεδίου: Ένα ισχυρότερο ηλεκτρικό πεδίο οδηγεί σε ταχύτερη μετανάστευση.

6. Οπτικοποίηση και ανάλυση: Τα διαχωρισμένα μόρια στη συνέχεια απεικονίζονται χρησιμοποιώντας διάφορες τεχνικές όπως χρώση ή φθορίζουσες βαφές. Οι προκύπτουσες ζώνες αναλύονται για να προσδιοριστούν το μέγεθος και η ποσότητα των μορίων που υπάρχουν στο δείγμα.

Βασικά σημεία που πρέπει να θυμάστε:

* Τύποι ηλεκτροφόρησης: Υπάρχουν διάφοροι τύποι ηλεκτροφόρησης, ο καθένας προσαρμοσμένος για συγκεκριμένες εφαρμογές και μόρια. Μερικοί κοινοί τύποι περιλαμβάνουν:

* ηλεκτροφόρηση πηκτής: Διαχωρίζει τα μόρια με βάση το μέγεθος και τη φόρτιση μέσω μιας μήτρας πηκτής.

* Ηλεκτροφόρηση τριχοειδούς: Διαχωρίζει τα μόρια σε ένα στενό τριχοειδές σωλήνα γεμάτο με διάλυμα ρυθμιστικού διαλύματος.

* Ισοηλεκτρική εστίαση: Διαχωρίζει τις πρωτεΐνες με βάση το ισοηλεκτρικό τους σημείο (PI).

* Εφαρμογές: Η ηλεκτροφόρηση χρησιμοποιείται ευρέως σε διάφορους τομείς:

* Μοριακή βιολογία: Ανάλυση DNA, RNA και πρωτεΐνες.

* φάρμακο: Διάγνωση των ασθενειών και της θεραπείας παρακολούθησης.

* Ιατροδικαστική: Ανάλυση δειγμάτων DNA σε ποινικές έρευνες.

* Επιστήμη τροφίμων: Ανάλυση της σύνθεσης και της ποιότητας των τροφίμων.

Με την κατανόηση της αρχής λειτουργίας της ηλεκτροφόρησης, οι ερευνητές μπορούν να αξιοποιήσουν αυτή την ισχυρή τεχνική για να αναλύουν και να ξεχωρίζουν τα μόρια για ένα ευρύ φάσμα επιστημονικών και πρακτικών σκοπών.