Ποια τεχνική θα χρησιμοποιούσε ένας επιστήμονας για την απομόνωση συγκεκριμένου οργανισμού;

Οι επιστήμονες χρησιμοποιούν μια ποικιλία τεχνικών για την απομόνωση συγκεκριμένων οργανιδίων. Εδώ είναι μερικές από τις πιο συνηθισμένες μεθόδους:

1. Κλασματοποίηση κυττάρων:

* Αυτή είναι μια κλασική τεχνική που περιλαμβάνει ομογενοποίηση (Breaking Open) Κύτταρα, ακολουθούμενα από Διαφορική φυγοκέντρηση .

* ομογενοποίηση Μπορεί να επιτευχθεί χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους όπως η ανάμειξη, η υπερήχηση ή η χρήση ενός γαλλικού τύπου.

* Διαφορική φυγοκέντρηση διαχωρίζει τα συστατικά των κυττάρων με βάση το μέγεθος και την πυκνότητα τους. Τα βαρύτερα οργανίδια (όπως οι πυρήνες) ίζημα πρώτα σε χαμηλότερες ταχύτητες, ενώ τα ελαφρύτερα οργανίδια (όπως τα ριβοσώματα) ίζημα σε υψηλότερες ταχύτητες.

2. Φυγοκέντρηση βαθμίδωσης πυκνότητας:

* Αυτή η τεχνική βελτιώνει την κλασμάτωση των κυττάρων με στρώση μιας κλίσης διαλύματος με αυξανόμενη πυκνότητα (π.χ. σακχαρόζη) σε ένα δείγμα ομογενοποιημένων κυττάρων.

* Τα οργανίδια μεταναστεύουν στο στρώμα πυκνότητας που ταιριάζει με τη δική τους πυκνότητα, επιτρέποντας περαιτέρω καθαρισμό.

3. Κυτταρομετρία ροής:

* Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί δοκούς λέιζερ για να αναλύσει και να ταξινομήσει μεμονωμένα κύτταρα με βάση το μέγεθος, το σχήμα και τις ιδιότητες φθορισμού τους.

* Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την απομόνωση συγκεκριμένων κυτταρικών τύπων που περιέχουν το επιθυμητό οργανισμό.

4. Ανοσοκαταβύθιση:

* Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί αντισώματα για να δεσμεύεται ειδικά για να στοχεύει πρωτεΐνες που σχετίζονται με συγκεκριμένα οργανίδια.

* Προσθέτοντας χάντρες επικαλυμμένα με τα αντισώματα, το οργανισμό που περιέχει την πρωτεΐνη στόχου μπορεί να απομακρυνθεί από το διάλυμα.

5. Μαγνητικός διαχωρισμός:

* Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί μαγνητικά σφαιρίδια επικαλυμμένα με αντισώματα έναντι συγκεκριμένων πρωτεϊνών οργανιδίων.

* Οι χάντρες συνδέονται με τα οργανίδια -στόχους, επιτρέποντάς τους να εξαχθούν χρησιμοποιώντας μαγνήτη.

6. Χρωματογραφία συγγένειας:

* Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί μια στήλη γεμάτη με έναν συγκεκριμένο προσδέτη που συνδέεται με το Organelle Target.

* Τα οργανίδια δεσμεύονται στον συνδέτη, ενώ άλλα κυτταρικά συστατικά περνούν από τη στήλη.

7. Microfluidics:

* Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί τις συσκευές μικρορευστοειδούς για να χειριστεί και να ξεχωρίσει τα κύτταρα και τα οργανίδια με βάση το μέγεθος, το σχήμα και τις ιδιότητες της επιφάνειας.

Η επιλογή της τεχνικής εξαρτάται από το συγκεκριμένο οργανισμό που απομονώνεται και την επιθυμητή καθαρότητα και ποσότητα.