Πώς θα πρέπει να ληφθούν καλλιέργειες αναερόβιων βακτηρίων;
1. Συλλογή δειγμάτων:
* Αποστολική συλλογή: Χρησιμοποιήστε αποστειρωμένα επιχρίσματα, βελόνες ή άλλα εργαλεία συλλογής για να αποτρέψετε τη μόλυνση του δείγματος με αερόβια οργανισμούς.
* κατάλληλες τοποθεσίες: Επιλέξτε Δείγματα τοποθεσιών που είναι γνωστό ότι φιλοξενούν αναερόβια βακτήρια, όπως:
* βαθιά πληγές: Τα αναερόβια βακτηρίδια ευδοκιμούν σε περιοχές με χαμηλή βλάβη οξυγόνου και υψηλού ιστού.
* αποστήματα: Αυτές οι εντοπισμένες λοιμώξεις περιέχουν συχνά αναερόβια βακτήρια.
* εντερική οδός: Το ανθρώπινο έντερο φιλοξενεί ένα ποικίλο αναερόβιο μικροβιοκτόνο.
* Στοματική κοιλότητα: Τα ούλα και τα δόντια μπορούν να φιλοξενήσουν αναερόβια βακτήρια.
2. Μεταφορά και χειρισμό:
* Αναερόβια μέσα μεταφοράς: Τοποθετήστε αμέσως το δείγμα σε ένα αναερόβιο μέσο μεταφοράς, τα οποία περιέχουν μειωμένους παράγοντες για να διατηρήσουν ένα περιβάλλον χαμηλού οξυγόνου.
* Ταχεία παράδοση: Μεταφέρετε το δείγμα στο εργαστήριο το συντομότερο δυνατό για να ελαχιστοποιήσετε την έκθεση σε οξυγόνο.
3. Τεχνικές καλλιέργειας:
* Αναερόβια θαλάμους: Το χρυσό πρότυπο για την καλλιέργεια των αναερόβων χρησιμοποιεί αναερόβια θαλάμους. Αυτά τα σφραγισμένα περιβλήματα περιέχουν ελεγχόμενη ατμόσφαιρα με χαμηλό οξυγόνο και υψηλές συγκεντρώσεις διοξειδίου του άνθρακα και αζώτου.
* Αναερόβια βάζα: Μια πιο φορητή και οικονομικά αποδοτική επιλογή, αναερόβια βάζα είναι σφραγισμένα δοχεία με χημικό θύλακα που απορροφά το οξυγόνο.
* Αναερόβια μέσα: Χρησιμοποιήστε εξειδικευμένα μέσα που έχουν σχεδιαστεί για την ανάπτυξη αναερόβιων βακτηρίων. Αυτά τα μέσα συχνά περιέχουν μειωμένους παράγοντες και διαμορφώνονται για να αναστέλλουν την ανάπτυξη αερόβιων βακτηρίων.
* επώαση: Επωφελήστε τις καλλιέργειες σε βέλτιστες θερμοκρασίες για αναερόβια βακτήρια, συνήθως 35-37 ° C, για 24-72 ώρες.
4. Αναγνώριση:
* Μικροσκοπική εξέταση: Εξετάστε την καλλιέργεια κάτω από ένα μικροσκόπιο για να αξιολογήσετε τις ιδιότητες βακτηριακής μορφολογίας, μεγέθους και γραμμών Gram.
* Βιοχημικές δοκιμές: Διεξάγετε μια σειρά βιοχημικών δοκιμών για τον εντοπισμό συγκεκριμένων αναερόβιων ειδών με βάση τις μεταβολικές τους δραστηριότητες.
* Μοριακές τεχνικές: Χρησιμοποιήστε αλληλουχία DNA ή PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) για να προσδιορίσετε τα συγκεκριμένα είδη αναερόβιων βακτηρίων.
Σημαντικές εκτιμήσεις:
* Προφυλάξεις ασφαλείας: Τα αναερόβια βακτήρια μπορούν να προκαλέσουν σοβαρές λοιμώξεις. Χειριστείτε δείγματα με ακραία φροντίδα και χρησιμοποιήστε τον κατάλληλο προσωπικό προστατευτικό εξοπλισμό (PPE).
* Έλεγχος ποιότητας: Παρακολουθεί τακτικά την αποτελεσματικότητα των αναερόβιων θαλάμων, των βάζα και των μέσων ενημέρωσης για να εξασφαλιστεί οι βέλτιστες συνθήκες για την αναερόβια ανάπτυξη.
Θυμηθείτε, οι συγκεκριμένες μέθοδοι συλλογής και καλλιέργειας αναερόβιων βακτηρίων μπορεί να διαφέρουν ανάλογα με τον τύπο του δείγματος, τον ύποπτο οργανισμό και τους διαθέσιμους πόρους.
