Τι είναι το παράδειγμα του ενζύμου περιορισμού;

Ακολουθούν μερικά παραδείγματα ενζύμων περιορισμού, μαζί με τους ιστότοπους αναγνώρισης τους και τι κάνουν:

Συνήθως χρησιμοποιούμενα ένζυμα περιορισμού

* Ecori:

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης:5'-Gaattc-3 '

* Δράση:Κόβει το DNA μεταξύ του G και του Α, δημιουργώντας κολλώδη άκρα.

* bamhi:

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης:5'-ggatcc-3 '

* Δράση:Κόβει το DNA μεταξύ G και G, δημιουργώντας κολλώδη άκρα.

* hindiii:

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης:5'-aagctt-3 '

* Δράση:Κόβει το DNA μεταξύ του Α και του Α, δημιουργώντας κολλώδη άκρα.

* psti:

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης:5'-CTGCAG-3 '

* Δράση:Κόβει το DNA μεταξύ C και G, δημιουργώντας κολλώδη άκρα.

* smai:

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης:5'-cccggg-3 '

* Δράση:Κόβει το DNA μεταξύ C και G, δημιουργώντας αμβλύ άκρα.

Πώς λειτουργούν τα ένζυμα περιορισμού

* Ιστοσελίδα αναγνώρισης: Τα ένζυμα περιορισμού αναγνωρίζουν και δεσμεύονται σε συγκεκριμένες αλληλουχίες σύντομων ϋΝΑ που ονομάζονται θέσεις αναγνώρισης. Αυτές οι τοποθεσίες είναι συνήθως 4-8 ζεύγη βάσεων μήκους.

* διάσπαση: Μόλις δεσμευτεί, το ένζυμο κόβει τη ραχοκοκαλιά DNA στο ή κοντά στο σημείο αναγνώρισης.

* Sticky Ends έναντι αμβλύ άκρων: Ορισμένα ένζυμα παράγουν "κολλώδη άκρα", τα οποία είναι σύντομες, μονόκλωνες προεξοχές που μπορούν να βασίσουν ζεύγος με συμπληρωματικές προεξοχές σε άλλα θραύσματα DNA. Άλλα ένζυμα παράγουν "αμβλύ άκρα", όπου το DNA κόβεται κατευθείαν.

Εφαρμογές των ενζύμων περιορισμού

* κλωνοποίηση γονιδίων: Χρησιμοποιείται για τη μείωση του DNA σε συγκεκριμένες θέσεις, επιτρέποντας στους ερευνητές να εισάγουν γονίδια σε φορείς (π.χ. πλασμίδια) για κλωνοποίηση.

* δακτυλικά αποτυπώματα DNA: Τα ένζυμα περιορισμού χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία μοναδικών μοτίβων θραυσμάτων DNA για ταυτοποίηση.

* Χαρτογράφηση γονιδιώματος: Τα ένζυμα περιορισμού χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία χαρτών περιορισμού, οι οποίοι δείχνουν τις θέσεις των θέσεων περιορισμού μέσα σε ένα γονιδίωμα.

* Γονιδιακή θεραπεία: Τα ένζυμα περιορισμού χρησιμοποιούνται για την τροποποίηση των γονιδίων για θεραπευτικούς σκοπούς.

Σημαντική σημείωση:

Υπάρχουν εκατοντάδες διαφορετικά ένζυμα περιορισμού, το καθένα με το μοναδικό σημείο αναγνώρισης και το πρότυπο διάσπασης. Μπορείτε να βρείτε βάσεις δεδομένων όπως το Rebase (http://rebase.neb.com/) που παρέχουν λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τα ένζυμα περιορισμού.