Πώς το Feulgen Stain DNA και το RNA;

Το Feulgen Stain κηλιδώνει συγκεκριμένα DNA και όχι RNA . Εδώ είναι:

* Η αντίδραση Feulgen: Αυτό περιλαμβάνει μια σειρά βημάτων που έχουν ως αποτέλεσμα το σχηματισμό ενός συμπλέγματος ματζέντα ειδικά με το DNA:

1. υδρόλυση: Το DNA υδρολύεται εν μέρει σε ένα ήπιο διάλυμα οξέος, σπάζοντας τον δεσμό πουρίνης-δεοξυριβόζης και εκθέτοντας την ομάδα αλδεΰδης της δεοξυριβόζης.

2. αντιδραστήριο Schiff: Αυτό το αντιδραστήριο, το οποίο είναι ένα άχρωμο διάλυμα φουκσίνης-σουλφουρικού οξέος, αντιδρά με την ομάδα αλδεΰδης της δεοξυριβόζης για να σχηματίσει μια ένωση με ματζέντα.

3. Αϋδρία: Αυτό αφαιρεί το υπερβολικό νερό και βοηθά στην εντατικοποίηση του χρώματος.

* Ειδικότητα για το DNA: Η αντίδραση Feulgen είναι ειδική για το DNA επειδή το RNA δεν έχει την ίδια ζάχαρη δεοξυριβόζης με την ομάδα αλδεΰδης που απαιτείται για την αντίδραση.

* Εναλλακτική χρώση για RNA: Για να λεκιάσουν το RNA, χρησιμοποιούνται άλλες μέθοδοι όπως:

* Μπλε μεθυλενίου: Μια βασική βαφή που συνδέεται με τις φωσφορικές ομάδες του RNA.

* pyronin y: Μια βαφή που συνδέεται με το RNA και εμφανίζεται κόκκινη κάτω από το μικροσκόπιο.

Συνοπτικά, το Feulgen Stain χρησιμοποιεί μια χημική αντίδραση ειδική για το DNA και δεν κηλιδώνει RNA.