Ποιοι είναι οι τρόποι με τους οποίους η χρωματογραφία μπορεί να διαχωρίσει τα χημικά σε ένα μείγμα;
1. Χρωματογραφία προσρόφησης:
* Αρχή: Αυτή η μέθοδος βασίζεται στις διάφορες συγγένειες των συστατικών για τη στατική φάση (συνήθως ένα στερεό προσροφητικό όπως το πυριτικό πήκτωμα ή η αλουμίνα). Τα εξαρτήματα που συνδέονται πιο έντονα στη στατική φάση κινούνται πιο αργά μέσω της στήλης.
* Παραδείγματα:
* Χρωματογραφία στήλης: Μια κατακόρυφη στήλη γεμάτη με τη στατική φάση. Το μείγμα εφαρμόζεται στην κορυφή και η κινητή φάση (υγρό ή αέριο) ρέει μέσα, διαχωρίζοντας τα συστατικά.
* χρωματογραφία λεπτού στρώματος (TLC): Ένα λεπτό στρώμα προσροφητικού είναι επικαλυμμένο σε ένα πιάτο. Το μείγμα εντοπίζεται στο κάτω μέρος και η κινητή φάση μετακινείται μέχρι την πλάκα με τριχοειδή δράση, διαχωρίζοντας τα εξαρτήματα.
2. Χρωματογραφία διαμερίσματος:
* Αρχή: Αυτή η μέθοδος εκμεταλλεύεται τις διαφορετικές διαλυτότητες των συστατικών σε δύο μη αναμίξιμες φάσεις (η στατική φάση και η κινητή φάση). Τα εξαρτήματα που είναι πιο διαλυτά στη στατική φάση θα κινούνται πιο αργά.
* Παραδείγματα:
* Χρωματογραφία αερίου (GC): Η στατική φάση είναι ένα μη πτητικό υγρό επικαλυμμένο με στερεά στήριξη και η κινητή φάση είναι αδρανές αέριο. Αυτό χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό πτητικών ενώσεων.
* Υψηλή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC): Χρησιμοποιεί μια αντλία υψηλής πίεσης για να αναγκάσει την κινητή φάση μέσω μιας συσκευασμένης στήλης που περιέχει τη στατική φάση (συνήθως ένα υγρό). Αυτό είναι κατάλληλο για τον διαχωρισμό ενός ευρέος φάσματος ενώσεων.
3. Χρωματογραφία ανταλλαγής ιόντων:
* Αρχή: Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί φορτισμένες λειτουργικές ομάδες στη στατική φάση για να δεσμεύσει τα ιόντα αντίθετου φορτίου από το μείγμα. Διαχωρίζονται διαφορετικά ιόντα με διαφορετικές συγγένειες για τη στατική φάση.
* Παραδείγματα:
* Χρωματογραφία ανταλλαγής κατιόντων: Χρησιμοποιεί μια αρνητικά φορτισμένη στατική φάση για να δεσμεύσει τα κατιόντα.
* Χρωματογραφία ανταλλαγής ανιόντων: Χρησιμοποιεί μια θετικά φορτισμένη στατική φάση για να δεσμεύσει τα ανιόντα.
4. Χρωματογραφία αποκλεισμού μεγέθους (SEC):
* Αρχή: Αυτή η μέθοδος διαχωρίζει τα μόρια με βάση το μέγεθός τους. Η στατική φάση έχει πόρους συγκεκριμένων μεγεθών. Τα μεγαλύτερα μόρια δεν μπορούν να εισέλθουν στους πόρους και να περάσουν από τη στήλη γρηγορότερα, ενώ τα μικρότερα μόρια μπορούν να εισέλθουν στους πόρους και να μετακινηθούν πιο αργά.
* Παραδείγματα:
* χρωματογραφία διήθησης πηκτής: Χρησιμοποιεί μια μήτρα πηκτής ως σταθερή φάση.
* χρωματογραφία διαπερατότητας πηκτής (GPC): Χρησιμοποιεί ένα πορώδες πολυμερές ως σταθερή φάση.
5. Χρωματογραφία συγγένειας:
* Αρχή: Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί μια εξαιρετικά συγκεκριμένη αλληλεπίδραση μεταξύ ενός συστατικού στο μίγμα και ενός συνδέτη ακινητοποιημένου στη στατική φάση. Αυτό επιτρέπει τον εξαιρετικά επιλεκτικό διαχωρισμό.
* Παραδείγματα:
* χρωματογραφία ανοσοπροστασίας: Χρησιμοποιεί αντισώματα ως προσδέματα για να δεσμεύσει και να διαχωρίζει συγκεκριμένες πρωτεΐνες.
* Χρωματογραφία συγγένειας μετάλλου: Χρησιμοποιεί μεταλλικά ιόντα ως προσδέματα για να δεσμεύουν και να ξεχωρίζουν πρωτεΐνες με συγκεκριμένες θέσεις δέσμευσης μετάλλων.
Σημείωση: Η συγκεκριμένη επιλογή της μεθόδου χρωματογραφίας εξαρτάται από τη φύση του μείγματος, τον επιθυμητό διαχωρισμό και τις ιδιότητες των ενώσεων. Κάθε μέθοδος έχει τα δικά της πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα και η επιλογή συχνά απαιτεί προσεκτική εξέταση.
