Ποια χρωστική ηλεκτρική φόρτιση θα λειτουργούσε καλύτερα σε ένα βακτηρίδια για να το λεκιάσει;
Γενικές εκτιμήσεις:
* Βακτηριακό κυτταρικό τοίχωμα: Τα βακτήρια έχουν ένα κυτταρικό τοίχωμα, το οποίο μπορεί να είναι είτε θετικό Gram είτε Gram-αρνητικό.
* Gram-θετικά βακτήρια: Έχετε ένα παχύ στρώμα πεπτιδογλυκάνης, το οποίο κηλιδώνει εύκολα με βασικές βαφές.
* Gram-αρνητικά βακτήρια: Έχετε ένα λεπτότερο στρώμα πεπτιδογλυκάνης και μια εξωτερική μεμβράνη, καθιστώντας τα λιγότερο διαπερατά σε βαφές. Συχνά απαιτούν ειδικές μεθόδους χρώσης ή βαφές που μπορούν να διεισδύσουν στην εξωτερική μεμβράνη.
* Φορτς βαφής:
* Βασικές βαφές: Θετικά φορτισμένο (κατιονικό) και τείνουν να συνδέονται με αρνητικά φορτισμένες δομές όπως τα νουκλεϊκά οξέα και τα συστατικά του κυτταρικού τοιχώματος. Παραδείγματα περιλαμβάνουν μπλε μεθυλενίου, κρυσταλλικό ιώδες και σαφρανίνη.
* όξινες βαφές: Αρνητικά φορτισμένες (ανιονικές) και τείνουν να δεσμεύονται με θετικά φορτισμένες δομές, όπως πρωτεΐνες. Παραδείγματα περιλαμβάνουν ηωσίνη και nigrosin.
Μέθοδοι χρώσης:
* Απλή χρώση: Χρησιμοποιεί μία μόνο βαφή για την απεικόνιση της βακτηριακής μορφολογίας (σχήμα και διάταξη). Οι βασικές βαφές χρησιμοποιούνται συνήθως για απλή χρώση βακτηρίων.
* χρώση γραμμάρια: Μια μέθοδος διαφορικής χρώσης που διακρίνει μεταξύ Gram-θετικών και Gram-αρνητικών βακτηρίων.
* Πρωτογενής λεκέ: Crystal Violet (βασική βαφή).
* Mordant: Διάλυμα ιωδίου, το οποίο σχηματίζει ένα σύμπλεγμα με τον κύριο λεκέ και αυξάνει τη συγγένειά του για το κυτταρικό τοίχωμα.
* Αποχρωματιστής: Αιθανόλη ή ακετόνη, η οποία αφαιρεί το λεκέ από Gram-αρνητικά βακτήρια αλλά όχι Gram-θετικά βακτήρια.
* Counterstain: Η σαφρανίνη (βασική βαφή) κηλιδώνει τα Gram-αρνητικά βακτήρια ροζ ή κόκκινο.
Επομένως:
* για γενική απλή χρώση: Βασικές βαφές (θετικά φορτισμένες) είναι συνήθως η καλύτερη επιλογή καθώς συνδέονται εύκολα με τα συστατικά των βακτηριακών κυττάρων.
* για χρώση γραμμάρια: Ένας συνδυασμός βασικών βαφών (κρυστάλλινη βιολετί και σαφρανίνης) χρησιμοποιείται για τη διαφοροποίηση μεταξύ Gram-θετικών και Gram-αρνητικών βακτηρίων.
Σημαντική σημείωση: Ορισμένοι εξειδικευμένοι λεκέδες μπορούν να χρησιμοποιούν όξινες βαφές ανάλογα με τη συγκεκριμένη δομή στόχου εντός των βακτηρίων.
Εξετάστε πάντα τη συγκεκριμένη μέθοδο χρώσης και τα βακτήρια στόχου κατά την επιλογή μιας κατάλληλης βαφής