Ποια διαδικασία χρησιμοποιεί ηλεκτρική ενέργεια για να διαχωρίσει την οργανική ένωση;
Δείτε πώς λειτουργεί:
* Αρχή: Η ηλεκτροφόρηση βασίζεται στο γεγονός ότι τα μόρια φέρουν ηλεκτρικό φορτίο. Η φόρτιση μπορεί να είναι εγγενής στο μόριο ή να προκαλείται από την προσθήκη μιας φορτισμένης ετικέτας.
* Διαδικασία: Ένα δείγμα της οργανικής ένωσης τοποθετείται σε πήκτωμα ή άλλο μέσο υποστήριξης. Εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό ρεύμα σε όλο το μέσο, προκαλώντας τη μεταναστευτική μετανάστευση των μορίων με βάση το φορτίο και το μέγεθος τους.
* Διαχωρισμός: Τα θετικά φορτισμένα μόρια μεταναστεύουν προς το αρνητικό ηλεκτρόδιο (κάθοδος), ενώ τα αρνητικά φορτισμένα μόρια μεταναστεύουν προς το θετικό ηλεκτρόδιο (ανόδου). Τα μικρότερα μόρια κινούνται ταχύτερα από τα μεγαλύτερα μόρια, με αποτέλεσμα τον διαχωρισμό.
* Ανίχνευση: Τα διαχωρισμένα μόρια στη συνέχεια απεικονίζονται χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους, όπως χρώση, φθορισμό ή φασματομετρία μάζας.
Τύποι ηλεκτροφόρησης:
* ηλεκτροφόρηση πηκτής: Αυτός είναι ο πιο συνηθισμένος τύπος, χρησιμοποιώντας μια μήτρα πηκτής για να διαχωριστούν τα μόρια που βασίζονται σε μέγεθος και φόρτιση.
* Ηλεκτροφόρηση τριχοειδούς: Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ένα στενό τριχοειδές σωλήνα γεμάτο με ένα ρυθμιστικό διάλυμα. Είναι εξαιρετικά ευαίσθητο και μπορεί να διαχωρίσει σύνθετα μίγματα.
* Ισοηλεκτρική εστίαση: Αυτή η τεχνική διαχωρίζει τα μόρια που βασίζονται στο ισοηλεκτρικό τους σημείο (PI), το οποίο είναι το pH στο οποίο ένα μόριο δεν έχει καθαρή φόρτιση.
Εφαρμογές ηλεκτροφόρησης:
* Ανάλυση DNA και RNA: Ανάλυση αλληλουχίας, ανάλυση θραυσμάτων και διαγνωστικά.
* Ανάλυση πρωτεΐνης: Χαρακτηρισμός, καθαρισμός και διάγνωση.
* Ιατροδικαστική επιστήμη: DNA δακτυλικά αποτυπώματα.
* Ιατρική διάγνωση: Προσδιορισμός των γενετικών διαταραχών, ανίχνευση λοιμώξεων και ανάλυση βιοδεικτών πρωτεϊνών.
Ενώ η ηλεκτροφόρηση είναι ένα ισχυρό εργαλείο για τον διαχωρισμό των οργανικών ενώσεων, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι δεν είναι κατάλληλο για όλες τις ενώσεις. Ορισμένες οργανικές ενώσεις μπορεί να μην φέρουν φορτίο ή μπορεί να είναι πολύ μεγάλες για να μεταναστεύσουν αποτελεσματικά στη μήτρα πηκτής.
