Γιατί το διάλυμα πρωτεΐνης γίνεται μοβ όταν προστίθεται θειικό χαλκό;
* Τα ιόντα χαλκού αλληλεπιδρούν με πεπτιδικούς δεσμούς: Το θειικό χαλκό (CUSO₄) διαχωρίζεται σε διάλυμα για να σχηματίσει ιόντα χαλκού (Cu²⁺). Αυτά τα ιόντα χαλκού έχουν ισχυρή συγγένεια για τα άτομα αζώτου σε πεπτιδικούς δεσμούς, τα οποία συνδέουν τα αμινοξέα μαζί σε πρωτεΐνες.
* Σχηματισμός συμπλόκου: Όταν τα ιόντα χαλκού αλληλεπιδρούν με δύο ή περισσότερους πεπτιδικούς δεσμούς, σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα με χαρακτηριστικό πορφυρό χρώμα. Αυτό το σύμπλεγμα σχηματίζεται λόγω των δεσμών συντονισμού μεταξύ του ιόντος χαλκού και των ατόμων αζώτου στους πεπτιδικούς δεσμούς.
* Ένταση χρώματος: Η ένταση του μοβ χρώματος είναι άμεσα ανάλογη με τη συγκέντρωση των πεπτιδικών δεσμών που υπάρχουν. Αυτό επιτρέπει τη χρήση της δοκιμής Biuret για την ποσοτικοποίηση της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες ενός δείγματος.
Σημείωση: Το μοβ χρώμα οφείλεται ειδικά στον σχηματισμό ενός συμπλόκου συντονισμού μεταξύ των ιόντων χαλκού και των πεπτιδίων δεσμών. Αυτό το σύμπλεγμα έχει ένα ξεχωριστό φάσμα απορρόφησης που προκαλεί το διάλυμα να εμφανιστεί μοβ.
Γιατί όχι άλλα χρώματα;
* Άλλες αντιδράσεις: Ενώ τα ιόντα χαλκού μπορούν να αλληλεπιδρούν με άλλα συστατικά σε ένα πρωτεϊνικό διάλυμα, το μοβ χρώμα είναι ειδικό για την αλληλεπίδραση με πεπτιδικούς δεσμούς. Οι αντιδράσεις με άλλα συστατικά μπορεί να οδηγήσουν σε διαφορετικές αλλαγές χρώματος, αλλά η δοκιμή Biuret βασίζεται ειδικά στο πορφυρό χρώμα για την ανίχνευση πεπτιδίων.
Συνοπτικά: Το μοβ χρώμα που παρατηρείται όταν προστίθεται θειικό χαλκό σε ένα πρωτεϊνικό διάλυμα είναι αποτέλεσμα του σχηματισμού ενός συμπλόκου συντονισμού μεταξύ των ιόντων χαλκού και των πεπτιδίων δεσμών. Αυτή η αντίδραση είναι η βάση για τη δοκιμή Biuret, μια ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδο για την ανίχνευση της παρουσίας πρωτεϊνών.
