Πώς προετοιμάζετε 0,5Μ Tris-HCL PH 7,2;
Υλικά:
* Βάση Tris: Tris (υδροξυμεθυλ) αμινομεθάνη (μοριακό βάρος:121,14 g/mol)
* Υδροχλωρικό οξύ (HCl): Συγκεντρωμένο (συνήθως 37%)
* απιονισμένο ή αποσταγμένο νερό:
* μετρητή pH ή pH χαρτί:
* ποτήρι ή φιάλη:
* Βαθμολογημένος κύλινδρος:
* Πλάκα ανάδευσης ή μαγνητικό αναδευτήρα:
* γυαλιά ασφαλείας και γάντια:
Διαδικασία:
1. Υπολογίστε την ποσότητα της βάσης Tris:
* Θέλετε ένα διάλυμα 0,5 m, που σημαίνει ότι χρειάζεστε 0,5 γραμμομορείς βάσης Tris ανά λίτρο διαλύματος.
* Πολλαπλασιάστε την επιθυμητή γραμμομορυχία με το μοριακό βάρος του Tris:0,5 mol/L * 121,14 g/mol =60,57 g/l
* Για μια τυπική λύση 1 L, θα χρειαστείτε 60,57 γραμμάρια βάσης Tris.
2. Διαλύστε τη βάση Tris:
* Ζυγίστε την υπολογιζόμενη ποσότητα βάσης Tris (60,57 g για 1 L).
* Προσθέστε περίπου 800 ml απιονισμένου νερού σε ποτήρι ή φιάλη.
* Ανακατέψτε απαλά το νερό ενώ σιγά -σιγά προσθέτοντας τη βάση Tris. Η βάση Tris θα διαλύεται πιο εύκολα εάν το νερό είναι ζεστό.
* Συνεχίστε να ανακατεύετε μέχρι να διαλυθεί πλήρως η βάση Tris.
3. Ρυθμίστε το pH:
* Σημαντική σημείωση: Προσθέστε πάντα οξύ σε νερό, ποτέ δεν νερό σε οξύ. Κάτι τέτοιο μπορεί να προκαλέσει μια βίαιη, εξώθερμη αντίδραση.
* Χρησιμοποιώντας ένα μετρητή pH: Προσθέστε προσεκτικά το συμπυκνωμένο HCl σταγόνα ενώ ανακατεύετε συνεχώς το διάλυμα. Παρακολουθήστε το ρΗ με μετρητή pH.
* Χρήση χαρτιού pH: Προσθέστε το HCl σταγόνα και δοκιμάστε το pH με χαρτί pH μετά από κάθε προσθήκη. Συνεχίστε μέχρι να φτάσετε στο επιθυμητό pH 7,2.
4. Ρυθμίστε την ένταση:
* Μόλις φτάσετε στο σωστό pH, προσθέστε περισσότερο απιονισμένο νερό για να φέρετε τον τελικό όγκο του διαλύματος σε 1 L.
5. Αποθηκεύστε το buffer:
* Αποθηκεύστε το παρασκευασμένο ρυθμιστικό Tris-HCl σε θερμοκρασία δωματίου (περίπου 20-25 ° C) ή στους 4 ° C στο ψυγείο. Είναι καλύτερο να το αποθηκεύσετε σε ένα σφραγισμένο δοχείο για να αποφύγετε την εξάτμιση και τη μόλυνση.
Σημαντικές εκτιμήσεις:
* Ασφάλεια: Πάντα να φοράτε κατάλληλα γυαλιά και γάντια ασφαλείας όταν χειρίζεστε χημικά, ειδικά συμπυκνωμένα HCl. Εργαστείτε σε μια καλά αεριζόμενη περιοχή.
* ακρίβεια pH: Εάν χρησιμοποιείτε χαρτί pH, ίσως χρειαστεί να προσαρμόσετε την ένταση για να εξασφαλίσετε ακριβείς μετρήσεις pH. Ένας μετρητής pH είναι πιο ακριβής.
* αραίωση: Εάν χρειάζεστε μικρότερο όγκο buffer, απλώς ρυθμίστε την ποσότητα της βάσης Tris και του νερού ανάλογα.
* σταθερότητα: Τα buffer Tris-HCL είναι γενικά σταθερά για αρκετούς μήνες όταν αποθηκεύονται σωστά. Ωστόσο, είναι πάντα καλή ιδέα να δοκιμάσετε το pH πριν χρησιμοποιήσετε το buffer εάν έχει αποθηκευτεί για μεγάλο χρονικό διάστημα.
Επιτρέψτε μου να ξέρω αν θέλετε να βοηθήσετε με τον υπολογισμό των όγκων που απαιτούνται για διαφορετικό όγκο buffer ή να έχετε άλλες ερωτήσεις!
