Ποια είναι η ουσία που απαιτείται για τη διάσπαση του φορέα DNA κατά τη διάρκεια της ανασυνδυασμένης τεχνολογίας;
Εδώ είναι γιατί:
* Ένζυμα περιορισμού: Αυτά είναι ένζυμα που αναγνωρίζουν και κόβουν ειδικά το DNA σε συγκεκριμένες αλληλουχίες που ονομάζονται θέσεις περιορισμού. Αυτά τα ένζυμα είναι σαν το μοριακό ψαλίδι, επιτρέποντας στους επιστήμονες να μειώσουν με ακρίβεια το φορέα DNA σε μια επιθυμητή θέση.
* DNA διάνυσμα: Αυτό είναι το μόριο DNA που δρα ως φορέας για να παραδώσει το γονίδιο ενδιαφέροντος σε ένα κύτταρο ξενιστή. Περιέχει συνήθως βασικά στοιχεία όπως μια προέλευση αναπαραγωγής, ένας επιλέξιμος δείκτης και μια θέση πολλαπλής κλωνοποίησης (MCS).
* διάσπαση: Αυτό αναφέρεται στη διαδικασία κοπής του μορίου DNA, επιτρέποντας την εισαγωγή του γονιδίου ενδιαφέροντος.
Πώς λειτουργεί:
1. Αναγνώριση της τοποθεσίας περιορισμού: Το ένζυμο περιορισμού συνδέεται με τον συγκεκριμένο σημείο περιορισμού του στο διάνυσμα DNA.
2. διάσπαση: Το ένζυμο κόβει το μόριο ϋΝΑ στη θέση περιορισμού, δημιουργώντας είτε κολλώδη άκρα (προεξέχοντα μονόκλωνο ϋΝΑ) είτε αμβλύ άκρα (χωρίς προεξοχές).
3. Εισαγωγή γονιδίου: Το γονίδιο ενδιαφέροντος, το οποίο έχει κοπεί με το ίδιο ένζυμο περιορισμού, μπορεί να εισαχθεί στο διανυσματικό DNA κοπής λόγω συμπληρωματικής ζεύξης βάσεων.
Αυτή η διαδικασία επιτρέπει τη δημιουργία ανασυνδυασμένων μορίων DNA, τα οποία στη συνέχεια εισάγονται σε κύτταρα ξενιστή για έκφραση του επιθυμητού γονιδίου.
