Πώς προετοιμάζετε το φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα του ρΗ 7,5;
Υλικά:
1. Απιζόμενο νερό
2. Φωσφορικό διϋδρογόνο κάλιο (KH2PO4)
3. Φωσφορικό υδρογόνο νατρίου (Na2HPO4)
4. Μετρητής pH
5. Μαγνητικός αναδευτήρας ή ανακατέψτε τη ράβδο
6. Ομάδα ογκομετρικής φιάλης (π.χ., 1000 ml)
7.
Αντιδραστήρια:
1. 0,2 Μ διάλυμα φωσφορικού διϋδρογόνου καλίου (KH2PO4):Διαλύστε 17,41 g KH2PO4 σε 1000 ml απιονισμένου νερού.
2, 0,2 Μ φωσφορικό υδρογόνο νατρίου (Na2HPO4) διάλυμα:Διαλύστε 28,48 g Na2HPO4 σε 1000 ml απιονισμένου νερού.
Διαδικασία:
1. Υπολογίστε τους όγκους των 0,2 m kH2PO4 και 0,2 Μ Na2HPO4 διαλύματα που απαιτούνται για την παρασκευή 1000 ml ρυθμιστικού φωσφορικού 0,1 Μ σε ρΗ 7,5. Χρησιμοποιήστε την εξίσωση Henderson-Hasselbalch:
ph =pka + log ([a-]/[ha])
όπου:
- Το PH είναι το επιθυμητό pH (7.5)
- Το ΡΚΑ είναι η σταθερά διάστασης του φωσφορικού οξέος (7.21)
- [a-] είναι η συγκέντρωση της βάσης συζευγμένης (Na2HPO4)
- [ΗΑ] είναι η συγκέντρωση του ασθενούς οξέος (KH2PO4)
Αναδιατάξτε την εξίσωση και αντικατάσταση των τιμών:
log ([a -]/[ha]) =ph - pka =7.5 - 7.21 =0.29
[A-]/[ha] =Antilog (0.29) =1.959
Από την επιθυμητή συγκέντρωση ρυθμιστικού διαλύματος (0,1 m) και την υπολογιζόμενη αναλογία ([a-]/[ha]), καθορίστε τους όγκους 0,2 m kh2po4 και 0,2 m na2HPO4 διαλύματα:
V (kh2po4) =[ha] / [συνολική συγκέντρωση] * Συνολικός όγκος
=0,1 m / (0,1 m + 0,1 m) * 1000 ml
=500 mL
V (Na2HPO4) =[a-] / [συνολική συγκέντρωση] * Συνολικός όγκος
=0,1 m / (0,1 m + 0,1 m) * 1000 ml
=500 mL
2. Μεταφορά 500 ml διαλύματος 0,2 Μ KH2PO4 σε ογκομετρική φιάλη 1000 ml.
3. Προσθέστε 500 mL διαλύματος 0,2 Μ Na2HPO4 στη ογκομετρική φιάλη.
4 στροβιλίστε την φιάλη απαλά για να αναμίξετε τα διαλύματα.
5. Ελέγξτε το ρΗ του ρυθμιστικού διαλύματος χρησιμοποιώντας ένα μετρητή pH. Ρυθμίστε το ρΗ έως 7.5 προσθέτοντας μικρούς όγκους είτε 0.2 m kH2PO4 είτε 0.2 m διαλύματα Na2HPO4 όπως απαιτείται.
6. Εάν είναι απαραίτητο, προσθέστε απιονισμένο νερό για να φέρετε τον τελικό όγκο του ρυθμιστικού διαλύματος μέχρι 1000 ml.
7. Ανακατέψτε το buffer χρησιμοποιώντας ένα μαγνητικό αναδευτήρα ή ανακατέψτε τη ράβδο.
Το ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού 0,1 Μ του ρΗ 7,5 είναι τώρα έτοιμο για χρήση. Αποθηκεύστε το buffer στην κατάλληλη θερμοκρασία για τις πειραματικές σας συνθήκες.
